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未知树

木虫 (著名写手)

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[交流] 【求助/交流】质粒，酶切前比酶切后跑的还快，神了？？！！！已有11人参与

最近做酶切，遇到一个非常神奇的事情。希望大家能够解释下，非常感谢！

用试剂盒提取了质粒，用不同的酶进行单酶切。结果发现：
1，线性化的质粒，大小与理论值相符合。
2，原质粒，竟然比酶切后线性化都跑得快？？？！！
PS：原质粒是用QIANGEN质粒抽提试剂盒提取的，应该是没有问题的。
但是，为什么质粒会跑的这么快啊！
质粒大小3341bp,  却跑到了2500bp左右。
难道说，超螺旋能够跑这么快？并且，电泳显示，提取的质粒只有一条带（一般都是三条带）。

M,1,2,3,4,5,6,7

M：DNA marker
1, 1号质粒单酶切Afl II;  2, 1号质粒单酶切EcoRV; 3, 1号质粒单酶切Not I
4, 2号质粒单酶切Afl II;  5, 2号质粒单酶切EcoRV; 6, 2号质粒单酶切Not I
7,2号原质粒（没有酶切）

[ Last edited by 未知树 on 2011-3-15 at 18:41 ]

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1楼2011-03-14 21:33:50

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dazhen9527

新虫 (小有名气)

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引用回帖:

5楼: Originally posted by 未知树 at 2011-03-15 18:38:14
啊，但是，我提取的质粒，怎么就只有超螺旋一种形式啊？一般而言，都是三条带，即使提取质量高，也是超螺旋多点儿。
现在的情况是，看不到另外两条带，只有超螺旋一条带了。
是因为提取的效果好，不是因为别的吗 ...

你在仔细看看，我都看到你的质粒是三条带了，上面两条比较弱，最下面是超螺旋跑得快，第二条和单酶切一样大，你的质粒没没问题