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shishunyan

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】关于微生物筛选的一些问题，需要各位帮助~

我要做从土壤中筛选降解多氯联苯的菌种，我想问下多氯联苯培养基怎么配，是灭菌前加多氯联苯还是灭菌后，灭菌前加这些有机物质灭菌时会挥发掉吧，之前加联苯灭菌的时候会有联苯会发出来能闻到，想问问各位是怎么加的？
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1楼 2011-03-08 09:41:38
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)
shishunyan(金币+2): 2011-03-08 10:47:14
灭菌后接种的时候加的，原因正如你说的怕挥发。
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2楼2011-03-08 10:06:05
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shishunyan

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by lxj341401 at 2011-03-08 10:06:05:
灭菌后接种的时候加的，原因正如你说的怕挥发。

这样的话可以用超净台的紫外灭菌吧
我是用丙酮作溶剂的，不知道对实验有没有影响？
刚开始做，很多细节不明白，呵呵，谢谢了
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3楼2011-03-08 10:52:33
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看天

木虫 (知名作家)
shishunyan(金币+1): 2011-03-08 14:36:13
引用回帖:
Originally posted by shishunyan at 2011-03-08 10:52:33:
这样的话可以用超净台的紫外灭菌吧
我是用丙酮作溶剂的，不知道对实验有没有影响？
刚开始做，很多细节不明白，呵呵，谢谢了

如果有菌紫外也难灭的 过滤吧
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4楼2011-03-08 11:43:00
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zhangxn2010

木虫 (著名写手)
shishunyan(金币+1): 2011-03-08 14:36:04
肯定是灭菌之后再加
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5楼2011-03-08 12:58:45
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xiaoma0556

木虫 (正式写手)
★
shishunyan(金币+3): 2011-03-08 19:52:42
rainwander(金币+1): 鼓励交流~~~ 2011-04-09 17:43:34
灭菌之后加
少量的挥发很正常  么什么影响  最实验最好用那种胶塞来减少挥发
我也是做降解的  共同进步
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6楼2011-03-08 16:24:06
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shishunyan

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by xiaoma0556 at 2011-03-08 16:24:06:
灭菌之后加
少量的挥发很正常  么什么影响  最实验最好用那种胶塞来减少挥发
我也是做降解的  共同进步

呵呵，谢谢了
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7楼2011-03-08 19:52:19
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天鸟

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by shishunyan at 2011-03-08 09:41:38:
我要做从土壤中筛选降解多氯联苯的菌种，我想问下多氯联苯培养基怎么配，是灭菌前加多氯联苯还是灭菌后，灭菌前加这些有机物质灭菌时会挥发掉吧，之前加联苯灭菌的时候会有联苯会发出来能闻到，想问问各位是怎么加 ...

刚刚我发表了个话题，可以相互讨论
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8楼2011-03-10 11:19:22
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郝钊

金虫 (小有名气)
★
shishunyan(金币+2): 2011-03-10 16:01:29
rainwander(金币+1): 鼓励交流~~~ 2011-04-09 17:43:56
其实操作起来没那么复杂，和加抗生素一样，倒平板之前加入就可以了。
多氯联苯配置后用微孔滤膜过滤除菌。
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9楼2011-03-10 11:25:51
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shishunyan

金虫 (小有名气)
★
wolfebst(金币+1): 欢迎多多交流 2011-04-11 12:38:52
引用回帖:
Originally posted by 郝钊 at 2011-03-10 11:25:51:
其实操作起来没那么复杂，和加抗生素一样，倒平板之前加入就可以了。
多氯联苯配置后用微孔滤膜过滤除菌。

学到了，谢谢啊，超净台开紫外灭菌的时侯搁进去一块灭菌不知道可不可以，微生物实验好麻烦啊，刚开始做还没人带，全得自己琢磨
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10楼2011-03-10 16:07:26
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郝钊

金虫 (小有名气)
★ ★
shishunyan(金币+2): 2011-03-10 16:52:02
rainwander(金币+2): 鼓励交流~~~ 2011-04-09 17:44:32
引用回帖:
Originally posted by shishunyan at 2011-03-10 16:07:26:
学到了，谢谢啊，超净台开紫外灭菌的时侯搁进去一块灭菌不知道可不可以，微生物实验好麻烦啊，刚开始做还没人带，全得自己琢磨

摸索条件的过程确实很艰难，但是自己得出的经验才经得住考验，遇到新的问题你就不会害怕，也会应付自如。此外，千万不要把希望全寄托在紫外上，紫外可以杀死细菌，但是芽孢，孢子，霉菌之类的就难了，所以多考虑高压灭菌和过滤除菌。
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11楼2011-03-10 16:44:03
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shishunyan

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 郝钊 at 2011-03-10 16:44:03:
摸索条件的过程确实很艰难，但是自己得出的经验才经得住考验，遇到新的问题你就不会害怕，也会应付自如。此外，千万不要把希望全寄托在紫外上，紫外可以杀死细菌，但是芽孢，孢子，霉菌之类的就难了，所以多考虑 ...

那就过滤灭菌吧，高压对有机物貌似行不通。。
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12楼2011-03-10 16:52:54
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hzhiding

铁杆木虫 (正式写手)
★ ★
rainwander(金币+2): 鼓励交流~~~ 2011-04-09 17:45:32
shishunyan(金币+49): 2011-04-09 23:04:49
灭菌之后加，。顺便给你找了篇文章，说不定对你的课题有帮助，NATURE的文章
http://www.nature.com/nsmb/journal/v9/n12/pdf/nsb866.pdf
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13楼2011-04-08 23:44:11
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grizzlies

木虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
wolfebst(金币+1): 谢谢你的参与 2011-04-11 12:39:55
这个需要是灭菌后加进去，不过可以用滤膜过滤的
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14楼2011-04-10 14:38:40
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wolfebst

至尊木虫 (职业作家)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by shishunyan at 2011-03-08 09:41:38:
我要做从土壤中筛选降解多氯联苯的菌种，我想问下多氯联苯培养基怎么配，是灭菌前加多氯联苯还是灭菌后，灭菌前加这些有机物质灭菌时会挥发掉吧，之前加联苯灭菌的时候会有联苯会发出来能闻到，想问问各位是怎么加 ...

我博士的课题做的是联苯和多氯联苯的微生物降解
应该是先将培养基灭菌
然后联苯的丙酮溶液需要用滤膜过滤
最后添加就可以了
如果操作得当，不会染霉菌的
为了防止挥发，最好把培养的瓶子密封好
祝你成功
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15楼2011-04-11 12:42:51
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shishunyan

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by wolfebst at 2011-04-11 12:42:51:
我博士的课题做的是联苯和多氯联苯的微生物降解
应该是先将培养基灭菌
然后联苯的丙酮溶液需要用滤膜过滤
最后添加就可以了
如果操作得当，不会染霉菌的
为了防止挥发，最好把培养的瓶子密封好
祝你成功

谢谢了，我现在分离出六种菌，正在做降解，回接以后只有一种菌的培养基变色，是不是这种菌最有可能，还有使用生长细胞做降解还是用休眠细胞好呢？
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16楼2011-04-12 10:13:11
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wolfebst

至尊木虫 (职业作家)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by shishunyan at 2011-04-12 10:13:11:
谢谢了，我现在分离出六种菌，正在做降解，回接以后只有一种菌的培养基变色，是不是这种菌最有可能，还有使用生长细胞做降解还是用休眠细胞好呢？

是变成黄色吗？很正常，2,3-二羟基联苯环断裂后的产物就变黄
我觉得有条件的话，生长细胞和休眠细胞都可以做
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17楼2011-04-12 11:40:17
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shishunyan

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by wolfebst at 2011-04-12 11:40:17:
是变成黄色吗？很正常，2,3-二羟基联苯环断裂后的产物就变黄
我觉得有条件的话，生长细胞和休眠细胞都可以做

是变绿了，应该也是正常吧，谢谢了，以后有问题再向你请教~
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18楼2011-04-12 14:21:42
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