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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 综合其他 » 【求助/交流】上样缓冲液
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冰鱼儿

金虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】上样缓冲液 已有5人参与

弱弱的问一下：上样缓冲液和电泳缓冲液有什么关系和区别?
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1楼 2011-03-06 18:28:53
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翱宇

禁虫 (正式写手)

将军
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看天(金币+2): good 2011-03-06 21:25:28
上样缓冲液是以溴酚蓝和甘油配置的，其实有些公司的2×Mix，PCR完了直接上样，不用加上样缓冲液。电泳缓冲液的配方去查一下吧，就是电泳时电泳槽里的缓冲液，配置琼脂糖胶也用这个。
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2楼2011-03-06 18:34:50
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brightfuture01

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看天(金币+2): 鼓励 2011-03-06 21:25:43
引用回帖:
Originally posted by 冰鱼儿 at 2011-03-06 18:28:53:
弱弱的问一下：上样缓冲液和电泳缓冲液有什么关系和区别?

上样缓冲液主要由 帮助样品沉入胶孔的（甘油）及指示剂（溴酚蓝）等组成。

电泳缓冲液起电介导作用，让带电荷的样品向某级移动。
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The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
3楼2011-03-06 18:36:46
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冰鱼儿

金虫 (正式写手)
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Originally posted by 翱宇 at 2011-03-06 18:34:50:
上样缓冲液是以溴酚蓝和甘油配置的，其实有些公司的2×Mix，PCR完了直接上样，不用加上样缓冲液。电泳缓冲液的配方去查一下吧，就是电泳时电泳槽里的缓冲液，配置琼脂糖胶也用这个。

2×Mix这个如何选择呢？
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4楼2011-03-06 20:13:03
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冰鱼儿

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by brightfuture01 at 2011-03-06 18:36:46:
上样缓冲液主要由 帮助样品沉入胶孔的（甘油）及指示剂（溴酚蓝）等组成。

电泳缓冲液起电介导作用，让带电荷的样品向某级移动。

5 X TBE:Tris碱54g;硼酸27.5g;20ml0.5M EDTA(pH=8.0),加蒸馏水定容至1L。高压灭菌。这个配方对吗？EDTA是加3.7225g么？不知道算的对不对？在线等答案~~
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5楼2011-03-06 20:53:32
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brightfuture01

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Originally posted by 冰鱼儿 at 2011-03-06 20:53:32:
5 X TBE:Tris碱54g;硼酸27.5g;20ml0.5M EDTA(pH=8.0),加蒸馏水定容至1L。高压灭菌。这个配方对吗？EDTA是加3.7225g么？不知道算的对不对？在线等答案~~

你怀疑你自己的化学学的不够么，对的。。。
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6楼2011-03-06 21:00:20
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冰鱼儿

金虫 (正式写手)
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Originally posted by brightfuture01 at 2011-03-06 21:00:20:
你怀疑你自己的化学学的不够么，对的。。。

最近是有点怀疑我都不知道那个Tris和硼酸的用量是咋算的能告诉我么？
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7楼2011-03-06 21:07:53
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brightfuture01

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看天(金币+2): 很活跃 2011-03-06 21:36:36
引用回帖:
Originally posted by 冰鱼儿 at 2011-03-06 21:07:53:
最近是有点怀疑我都不知道那个Tris和硼酸的用量是咋算的能告诉我么？

,你可以去问问你师兄弟师姐妹啥的。。。没有的话可以问下导师。。。

这个是初中化学的纯计算问题。。。。。
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8楼2011-03-06 21:35:57
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翱宇

禁虫 (正式写手)

将军
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Originally posted by 冰鱼儿 at 2011-03-06 20:13:03:
2×Mix这个如何选择呢？

康为世纪有这个东西，名字就是叫 2×PCRMix  ，只需要加引物和模板就行了，你可以查阅下！
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9楼2011-03-06 21:45:44
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yixuanwin

铁杆木虫 (正式写手)
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Originally posted by 冰鱼儿 at 2011-03-06 20:53:32:
5 X TBE:Tris碱54g;硼酸27.5g;20ml0.5M EDTA(pH=8.0),加蒸馏水定容至1L。高压灭菌。这个配方对吗？EDTA是加3.7225g么？不知道算的对不对？在线等答案~~

这是数学问题。


ps  TAE更普遍一点。
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10楼2011-03-06 22:03:50
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