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南方科技大学公共卫生及应急管理学院2026级博士研究生招生报考通知(长期有效)
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xiaoee2728

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】提基因组DNA,加了异丙醇没有DNA析出~~~已有9人参与

提基因组DNA,加了异丙醇-20度放置15min后离心,能看到明显的沉淀,再加入70%乙醇洗涤后发现沉淀溶解(可能是该试剂放置时间过长,乙醇已经挥发),然后加入等体积的异丙醇重新沉淀,离心后没有沉淀。
    然后听从了师兄的建议,又加了2.5倍体积的无水乙醇和十分之一体积的3M的醋酸钠,-20度放置15分钟后离心,仍未见沉淀,请问还有没有方法将DNA提取出来了,现在的总体积已经有7ml了。
     这个实验前期处理细胞很费时间,实在不想重新做了,希望各位牛人帮帮忙啊!
    万分感激~~~
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似水流年
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xiaoee2728

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by gaoyang636 at 2011-03-04 21:38:47:
总体积7ml~还不算 BT~你可以试试用Invitrogen的Purelink PCR purufication kit~用挂柱子的方法给挂下来~祝你好运

万分感谢,放在-20度3个小时后总算析出来了,虽然损失了一部分,但最终实验结果还可以,谢谢大家啦!
似水流年
13楼2011-03-05 08:50:32
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nininini

银虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
看不到沉淀未必没有吧~~可以先电泳看看结果啊
2楼2011-03-03 10:49:26
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starseacow

专家顾问 (职业作家)

凶多吉少了,估计得重提了
植物生理群69993869,为避免广告,申请加入请提供木虫昵称,院校及专业信息
3楼2011-03-03 10:50:28
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
rainwander(金币+1): 鼓励积极参与交流~~~ 2011-03-03 11:09:32
如果乙醇洗这一步,里头含了不少的水,那么DNA就溶解掉了……
太大体积的东西,醇很难沉淀下东西了,因为实在很稀
4楼2011-03-03 10:58:36
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