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【求助/交流】两重PCR
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xwsooo
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[交流]
【求助/交流】两重PCR
我用的是50微升PCR体系,一个反应体系里有两对引物(共三条引物,一条是公共引物--下游引物),两条目的产物相差18bp,用4%琼脂糖胶跑了60min,不知道为什么,有时候能分出较小的那个条带,有时候分不出来,感觉好像该条带的上游引物被另外一条上游引物竞争性抑制了?
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1楼
2011-02-28 13:33:02
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xwsooo
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Originally posted by
brightfuture01
at 2011-02-28 13:39:50:
为什么不尝试着分成两次PCR做呢,呵呵。你这个相当于半巢式了。
分两次已经做过了,问题不大,我想一次解决最好了~~~~有没有什么好建议呢??
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6楼
2011-02-28 22:19:34
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brightfuture01
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xwsooo(金币+1): 2011-02-28 22:18:29
为什么不尝试着分成两次PCR做呢,呵呵。你这个相当于半巢式了。
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2楼
2011-02-28 13:39:50
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xwsooo(金币+1): 2011-02-28 22:19:55
引用回帖:
Originally posted by
xwsooo
at 2011-02-28 13:33:02:
我用的是50微升PCR体系,一个反应体系里有两对引物(共三条引物,一条是公共引物--下游引物),两条目的产物相差18bp,用4%琼脂糖胶跑了60min,不知道为什么,有时候能分出较小的那个条带,有时候分不出来,感觉好 ...
那你分别单独PCR然后一起跑电泳看下,做个对比嘛
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4楼
2011-02-28 13:48:19
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leiyunting
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恩,做个对照好
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5楼
2011-02-28 13:49:43
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