24小时热门版块排行榜    

查看: 852  |  回复: 10
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

xwsooo

银虫 (小有名气)


[交流] 【求助/交流】两重PCR

我用的是50微升PCR体系,一个反应体系里有两对引物(共三条引物,一条是公共引物--下游引物),两条目的产物相差18bp,用4%琼脂糖胶跑了60min,不知道为什么,有时候能分出较小的那个条带,有时候分不出来,感觉好像该条带的上游引物被另外一条上游引物竞争性抑制了?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 抢金币啦!回帖就可以得到:

查看全部散金贴

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xwsooo

银虫 (小有名气)


引用回帖:
Originally posted by brightfuture01 at 2011-03-01 20:55:02:
呵呵,两对引物一起的时候,理论上会由于它们的退火温度不同而有一个最佳的退火温度使得你的产物最亮。

哦,酱紫阿,我现在在调两条上游引物的浓度(正交设计,梯度~~),恩,那我也试一试退火温度梯度,(想想看现在的退火温度貌似比较合适条带较量的引物)
11楼2011-03-01 21:38:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答
xwsooo(金币+1): 2011-02-28 22:18:29
为什么不尝试着分成两次PCR做呢,呵呵。你这个相当于半巢式了。
2楼2011-02-28 13:39:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

love_st

金虫 (著名写手)


xwsooo(金币+1): 2011-02-28 22:19:55
引用回帖:
Originally posted by xwsooo at 2011-02-28 13:33:02:
我用的是50微升PCR体系,一个反应体系里有两对引物(共三条引物,一条是公共引物--下游引物),两条目的产物相差18bp,用4%琼脂糖胶跑了60min,不知道为什么,有时候能分出较小的那个条带,有时候分不出来,感觉好 ...

那你分别单独PCR然后一起跑电泳看下,做个对比嘛
4楼2011-02-28 13:48:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

leiyunting

木虫 (著名写手)


恩,做个对照好
5楼2011-02-28 13:49:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 国自科面上基金字体 +6 iwuli 2026-03-12 7/350 2026-03-16 21:18 by sculhf
[考研] 333求调剂 +3 文思客 2026-03-16 7/350 2026-03-16 18:21 by 文思客
[考研] 085600材料与化工 求调剂 +13 enenenhui 2026-03-13 14/700 2026-03-16 15:19 by 了了了了。。
[考研] 309求调剂 +5 花与叶@ 2026-03-10 5/250 2026-03-16 14:13 by 哦哦123
[考研] 326求调剂 +4 上岸的小葡 2026-03-15 5/250 2026-03-16 08:39 by Linda Hu
[考研] 材料工程专硕,一志愿中国矿业大学,总分314,求调剂 +5 无懈可击的巨人 2026-03-10 5/250 2026-03-14 00:37 by JourneyLucky
[考研] 一志愿华中农业大学071010,总分三百二,求调剂 +3 困困困困坤坤 2026-03-10 3/150 2026-03-14 00:35 by JourneyLucky
[考研] 311求调剂 +8 zchqwer 2026-03-10 8/400 2026-03-14 00:01 by JourneyLucky
[考研] 材料工程,326分,求调剂 +6 KRSLSR 2026-03-10 6/300 2026-03-13 23:47 by JourneyLucky
[考研] 341求调剂 +3 番茄头--- 2026-03-10 3/150 2026-03-13 23:07 by JourneyLucky
[考研] 337一志愿华南理工0805材料求调剂 +7 mysdl 2026-03-11 9/450 2026-03-13 22:43 by JourneyLucky
[考研] 281求调剂 +9 Koxui 2026-03-12 11/550 2026-03-13 20:50 by Koxui
[考研] 293求调剂 +3 世界首富 2026-03-11 3/150 2026-03-13 16:27 by JourneyLucky
[考研] 考研调剂 +4 芬达46 2026-03-12 4/200 2026-03-13 16:04 by ruiyingmiao
[论文投稿] 投稿问题 5+4 星光灿烂xt 2026-03-12 6/300 2026-03-13 14:17 by god_tian
[考研] 274求调剂0856材料化工 +12 z2839474511 2026-03-11 13/650 2026-03-13 10:39 by peike
[考研] 296求调剂 +3 大口吃饭 身体健 2026-03-13 3/150 2026-03-13 10:31 by 学员8dgXkO
[考研] 化工学硕306求调剂 +9 42838695 2026-03-12 9/450 2026-03-13 10:16 by houyaoxu
[考博] 2026年博士申请 +3 QwQwQW10 2026-03-11 3/150 2026-03-12 17:58 by gxch43
[基金申请] 提交后的基金本子,已让学校撤回了,可否换口子提交 +3 dut_pfx 2026-03-10 3/150 2026-03-11 08:38 by kudofaye
信息提示
请填处理意见