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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 【求助】探讨液相结束后冲洗柱子的方法
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yongxiu2008

木虫 (职业作家)

[交流] 【求助】探讨液相结束后冲洗柱子的方法 已有6人参与

一般都是甲醇-水90：10冲20分钟，甲醇15分钟，判断原则就是基线比较平，没有峰了，但也会看看柱压是不是和前一段的一样，结果发现前几项都达标，就是柱压比较低，甲醇-水90：10冲20分钟比早晨开始时低16个压，问题出在哪里了呢？请专家帮忙分析下吧！
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1楼 2011-02-26 19:36:34
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tq0183p

铜虫 (初入文坛)
★
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排除不排除系统或柱子漏？你又进样品了么？要是进样品了峰和以前一样吗？是不是柱子塌了
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2楼2011-02-26 20:00:54
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sun21

金虫 (小有名气)
★ ★
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novus(金币+1): 多谢交流！色谱柱冲洗维护的方式不是绝对的，主要看之前适用的流动相种类以及分析的样品性质，不那么绝对的！ 2011-02-28 19:43:19
楼主搞反了吧？应该是先用甲醇-水10：90冲洗柱子，否则怎么洗脱柱子中的酸和盐呢？你那样做只会使盐沉淀在柱子里，影响柱效。
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3楼2011-02-26 20:08:02
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yongxiu2008

木虫 (职业作家)
引用回帖:
Originally posted by tq0183p at 2011-02-26 20:00:54:
排除不排除系统或柱子漏？你又进样品了么？要是进样品了峰和以前一样吗？是不是柱子塌了

之间没有进过样，就是空了一个晚上而已！
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4楼2011-02-27 19:29:34
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掌心樱小桃

金虫 (小有名气)
★
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是进空气了么？我们实验室都是用超声过的甲醇冲洗半个小时就关了，中间不敢进空气的...
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5楼2011-02-27 19:48:41
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limeiquan

新虫 (初入文坛)
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引用回帖:
885楼: Originally posted by sun21 at 2011-02-26 20:08:02
楼主搞反了吧？应该是先用甲醇-水10：90冲洗柱子，否则怎么洗脱柱子中的酸和盐呢？你那样做只会使盐沉淀在柱子里，影响柱效。

我以前也是用甲醇：水=90：10冲洗半个小时左右，再用95%甲醇冲洗。后来有同学提醒说应该先用水：甲醇=90：10冲洗10分钟左右，再逐渐升高甲醇的比例，如10%甲醇10分钟、30%甲醇5分钟、再依次升高到90%甲醇冲洗半个小时，最后用95%或99%的甲醇保存柱子。不知对不对，还是说要根据具体的样品的成分的极性来定怎么冲洗？
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把自己的知识和经验拿来分享是件快乐的事情，你愿意，我也愿意，所以我们可以说是互为良师益友。
6楼2012-08-16 00:13:51
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woniu023

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
一般先用10%有机相冲洗半小时左右，在用8-90%甲醇冲15min，如果长期不用了，用100%封存。如果你使用的是缓冲盐的话，那这时间是不够的，至少低浓度有机相要冲几个小时，最好0.5流速过夜。可以自己设个关机的梯度洗脱，自动各浓度有机相冲洗。
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7楼2012-08-16 11:02:26
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