24小时热门版块排行榜    

查看: 582  |  回复: 2

[交流] 【求助/交流】原核表达急切求助!

各位虫友在做原核蛋白表达时,有没有这种情况:pet28a连入目的片段测序验证正确后后,转化BL21(DE3), 挑菌,37度过夜,取菌到新鲜培养基,接种量为1%,37度,在OD值达到0.6后,加入IPTG,终浓度为0.4mM,0.6mM,0.8mM, 30度诱导表达,近两个小时后,菌液变澄清,且有絮状白色沉淀,不知哪位虫友碰到过类似的情况?是不是有噬菌体的原因?还是。。。。。?正在表达的蛋白其中一个总是这样,换了许多宿主细胞都是这样,另外的一个蛋白虽然没有变澄清,但SDS-PAGE检测蛋白没有表达,不知虫友们有没有类似的经历?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 抢金币啦!回帖就可以得到:

查看全部散金贴

已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
blackrose8089(金币+1): 2011-02-26 17:58:40
看起来像菌体自溶,是不是表达蛋白对宿主有毒性。
2楼2011-02-26 17:28:46
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
blackrose8089(金币+1): 正在建立GST载体来用一下,看看能不能好些! 2011-02-26 17:59:27
这种情况下最好能换个载体试试
3楼2011-02-26 17:30:00
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 blackrose8089 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[教师之家] 焦虑 +7 水冰月月野兔 2026-03-13 9/450 2026-03-16 10:00 by Quakerbird
[考研] 0703化学调剂 +4 妮妮ninicgb 2026-03-15 7/350 2026-03-16 09:43 by 闲人终南山
[考研] 321求调剂 +4 大米饭! 2026-03-15 4/200 2026-03-16 08:41 by Linda Hu
[考研] 材料与化工一志愿南昌大学327求调剂推荐 +6 Ncdx123456 2026-03-13 7/350 2026-03-16 07:44 by L135790
[考博] 东华理工大学化材专业26届硕士博士申请 +6 zlingli 2026-03-13 6/300 2026-03-15 20:00 by ryzcf
[考研] 中科大材料专硕319求调剂 +3 孟鑫材料 2026-03-13 3/150 2026-03-14 18:10 by houyaoxu
[基金申请] 现在如何回避去年的某一个专家,不知道名字 +3 zk200107 2026-03-12 6/300 2026-03-14 17:13 by zk200107
[考研] 【0703化学调剂】-一志愿华中师范大学-六级475 +5 Becho359 2026-03-11 5/250 2026-03-14 11:35 by 哦哦123
[考研] 材料与化工 一志愿山大 321分 求调剂 +7 每天散步 2026-03-09 8/400 2026-03-14 02:18 by JourneyLucky
[考研] 333求调剂 +3 球球古力 2026-03-09 3/150 2026-03-14 01:57 by JourneyLucky
[考研] 318求调剂 +3 李新光 2026-03-10 3/150 2026-03-14 00:21 by JourneyLucky
[考研] 材料371求调剂 +9 鳄鱼? 2026-03-11 11/550 2026-03-13 22:53 by JourneyLucky
[考研] 333求调剂 +3 球球古力 2026-03-11 3/150 2026-03-13 21:27 by JourneyLucky
[考研] 332求调剂 +3 Zz版 2026-03-13 3/150 2026-03-13 20:36 by 18595523086
[考研] 工科278分求调剂 +5 周慢热啊 2026-03-12 7/350 2026-03-13 15:49 by JourneyLucky
[考研] 295求调剂 +3 小匕仔汁 2026-03-12 3/150 2026-03-13 15:17 by vgtyfty
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +3 崔wj 2026-03-12 4/200 2026-03-12 19:33 by 求调剂zz
[考研] 一志愿江南大学085701环境工程专硕总分287求调剂 +5 18266118446 2026-03-09 5/250 2026-03-11 16:51 by 2020015
[考研] 哈工大材料324求调剂 +6 闫旭东 2026-03-10 8/400 2026-03-10 22:49 by 星空星月
[硕博家园] 木虫好像不热闹了,是不是? +4 偏振片 2026-03-10 4/200 2026-03-10 09:51 by longwave
信息提示
请填处理意见