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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】如何测定蛋白质的分子量大小？
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wqf@126.com

银虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】如何测定蛋白质的分子量大小？ 已有11人参与

各位大侠：
       本人表达的一个可溶性蛋白GB1，跑出的蛋白胶与理论的分子量大小不符，请问还有哪些方法可以测定出蛋白质分子量的大小？需要准备哪些试剂和仪器？如何操作？谢谢各位了！
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1楼 2011-02-22 18:45:29
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

文献杰出贡献
★
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分子筛也可以确定，不过比较繁琐。
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The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
2楼2011-02-22 19:05:48
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cxt86

金虫 (小有名气)
★ ★ ★
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amisking(金币+2): 鼓励发帖交流。 2011-02-22 19:57:58

过筛的话。。。如果蛋白不纯就难搞了
我觉得表达了蛋白和预测不符的时候，去测表达蛋白的分子量好像有点钻牛角尖，应该想办法让表达的蛋白符合预测或者查看哪里出了问题。。。
问下差多少？是不是多了个标签蛋白导致的不符合预测。。。
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3楼2011-02-22 19:41:04
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sutao1979

木虫 (著名写手)

小木虫10年groupleader
★
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一般不是膜蛋白用marker就可以了
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会当凌绝顶，一览众山小
4楼2011-02-22 19:46:19
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wqf@126.com

银虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by cxt86 at 2011-02-22 11:41:04:
过筛的话。。。如果蛋白不纯就难搞了
我觉得表达了蛋白和预测不符的时候，去测表达蛋白的分子量好像有点钻牛角尖，应该想办法让表达的蛋白符合预测或者查看哪里出了问题。。。
问下差多少？是不是多了个标签 ...

理论值是6.2KDa,胶上显示为13KDa左右，它没有半胱氨酸，所以也不可能形成二聚体。它上面也没有标签……
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5楼2011-02-22 21:06:20
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶
★ ★ ★
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lstt09nk(金币+2): 鼓励交流 2011-02-22 22:27:22

6.2和13数字看起来比较大，但如果MARKER里比较小的条带不合适用来做参照的话，是很难估计你蛋白质的大小的。最好的情况是MARKER里6和13的条带各有一条，跑到6就是6,13就是13，但那是不可能的。MARKER只能是粗略估计，不会很准的。先说说你的MARKER都有哪些条带吧，也许该换一个有好几条条带都主要分布在10KD左右的MARKER。PS：分子筛也不绝对准的，可能是我人品有问题，即使是分子量差一倍的蛋白质也不能用G200来分开，也许楼主做得到吧。
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流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
6楼2011-02-22 21:46:29
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zhaocy8903

木虫 (知名作家)

质谱。。
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7楼2011-02-22 22:19:27
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sunwei57

木虫 (小有名气)
SDS-PAGE
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8楼2012-03-22 19:34:41
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糖小泡daddy

铜虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
小分子蛋白质可以试试氨基酸分析仪
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人！一定要靠自己
9楼2013-01-08 19:37:20
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zjlyyukang

铜虫 (初入文坛)
推荐质谱~~~
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10楼2013-01-08 20:27:51
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