| 查看: 671 | 回复: 0 | |||
[交流]
【求助/交流】网上盛传的 冷酒精沉淀法抗体纯化 是否真能用？？？？？？？？？？
|
|
本人欲采取一种简单的方法提取免疫球蛋白，由于一些原因不能采用辛酸-硫酸铵沉淀法，在网上查得冷酒精沉淀法，经简单试提，所得抗体浊度极大，很是怀疑这种方法能否可行 下面是网上的方法http://www.biomart.cn/experiment/430/502/503/507/17893.htm 1、 血清加3倍体积的蒸馏水，调节 pH至7.7(±)冷却到0℃。在激烈搅拌的条件下，加预冷的酒精（-20℃）到最终浓度为20%，保持在-5℃。产生的沉淀（a），含有大多数种类的免疫球蛋白。 2、 沉淀a悬浮于25倍体积的0.15～20mol/l NaCl溶液（冷）中，加有0.05mol/l醋酸调节 pH到5.1，产生的沉淀（b），包括大部分的IgA和IgM，IgG留在上清液内。 3、调节 上清液的pH到7.4，加冷酒精（-20℃～-30℃）到最终浓度为25%，维持在-5℃。所得到的沉淀（c）含有90%～98% IgG。不同动物，IgG分离的条件和产量略有不同。见下表。 4、从沉淀（b）可按下述方法进一步分离出IgA和IgM的混合物：将沉淀（b）悬浮在0℃ 水中，调节 pH到5.1，离心去除不溶的蛋白。调节 上清液离子强度到0.01～0.0075,pH5.5。然后加冷酒精到最终浓度为10%，保持在 –2℃或-3℃低温，所得的沉淀（b-b）主要含IgA和IgM。 本人也知道，网上的东西多半不靠谱，若是有种方法提取经验的人，希望给予一点提示 |
回复此楼» 猜你喜欢
为什么蛋白质氨基酸测定大家都测17种?
已经有5人回复
-
《灰分记：我与坩埚的“灰烬”之恋》
已经有3人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有125人回复
-
求助 食品检验工（基础知识），中国劳动社会出版社 电子版
已经有5人回复
-
胶体几丁质的结晶度？
已经有0人回复
-
诚挚招收全日制博士！！！中国农业科学院麻类研究所谭志坚研究员课题组招收博士
已经有2人回复
-
三甲基羟乙基丙二胺的合成路线
已经有5人回复
找到一些相关的精华帖子，希望有用哦~
涂布3.6平方米，成本在10元以内70℃以内（冷压）固化的胶黏剂
已经有4人回复- 如何纯化大豆球蛋白-果寡糖糖基化产物？
已经有8人回复
- 有机合成结构分析纯化等
已经有4人回复
- 考博成绩已出，不知是否能录取
已经有24人回复
- 沉淀法净化溶液中杂质离子导致主要离子损失严重，收率很低的问题
已经有5人回复
- 诚招有分子生物学及蛋白质表达纯化背景的博士一年级同学到美国来做抗体engineering
已经有16人回复
- 关于细菌蛋白质分离纯化
已经有8人回复
- 求几种物质纯化方法！！！
已经有7人回复
- 【求助/交流】乙醇沉淀法纯化cDNA
已经有4人回复
- 【求助/交流】有做过单克隆抗体纯化的大侠帮忙给看一下
已经有5人回复
- 【求助/交流】大家做蛋白纯化的都到什么型号柱子，效果怎么样呢
已经有10人回复
- 【求助】DMF纯化的方法
已经有6人回复
点击这里搜索更多相关资源科研从小木虫开始，人人为我，我为人人