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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】葡聚糖凝胶层析可以用有机试剂来展开吗？如果用水，可以分非水溶的吗
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ksnight

金虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】葡聚糖凝胶层析可以用有机试剂来展开吗？如果用水，可以分非水溶的吗

我的目标产物MW=5000  想分离掉体系中的MW=2000 PEG原料。
不知道葡聚糖凝胶层析有没有用啊？   试了各种洗的方法，效果不好。  


我看葡聚糖凝胶层析都是用来分生物分子，用水和盐水作为展开剂，不知道这种可不可以用有机溶剂作为展开剂不？

如果不是水溶或盐水的怎么用葡聚糖凝胶层析来分离呢？
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1楼 2011-02-16 16:53:30
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qdeev

金虫 (正式写手)
★
ksnight(金币+2): 2011-02-17 09:06:49
dhd997(金币+1): 鼓励交流 2011-02-17 11:05:35
葡聚糖凝胶是在水相和有机相都稳定的材料
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2楼2011-02-17 08:20:59
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zhaocy8903

木虫 (知名作家)
★
ksnight(金币+1): 2011-02-17 09:10:01
dhd997(金币+1): 鼓励交流 2011-02-17 11:05:51
SEPHADEX LH 系列可以用有机溶剂
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3楼2011-02-17 08:36:32
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ksnight

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by qdeev at 2011-02-17 08:20:59:
葡聚糖凝胶是在水相和有机相都稳定的材料

那就代表可以像硅胶柱那样用二氯甲烷和甲醇为展开剂了哦？

硅胶是用TLC来确定展开剂的极性，葡聚糖凝胶如何确定需要的极性呢？
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4楼2011-02-17 09:08:49
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ksnight

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by zhaocy8903 at 2011-02-17 08:36:32:
SEPHADEX LH 系列可以用有机溶剂

听说这个特别的贵啊？
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5楼2011-02-17 09:09:50
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qdeev

金虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★
dhd997(金币+2): 感谢热心交流 2011-02-18 10:51:48
dhd997(金币+2): 感谢交流 2011-02-18 10:51:59
ksnight(金币+1): 2011-02-18 12:20:56
引用回帖:
Originally posted by ksnight at 2011-02-17 09:08:49:


那就代表可以像硅胶柱那样用二氯甲烷和甲醇为展开剂了哦？

硅胶是用TLC来确定展开剂的极性，葡聚糖凝胶如何确定需要的极性呢？

第一个问题是可以用。。
第二个问题是：据我所知，绝大多数的葡聚糖凝胶都是用它的分子筛效果，尤其是Sephadex LH 系列（在用甲醇的条件下）。。如果说是摸极性条件，主要是用TLC上来作为依据，或者直接上柱子。。
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6楼2011-02-18 08:13:51
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dhd997

荣誉版主 (文坛精英)
引用回帖:
Originally posted by qdeev at 2011-02-18 08:13:51:


第一个问题是可以用。。
第二个问题是：据我所知，绝大多数的葡聚糖凝胶都是用它的分子筛效果，尤其是Sephadex LH 系列（在用甲醇的条件下）。。如果说是摸极性条件，主要是用TLC上来作为依据，或者直接上柱 ...

操作失误，多评的金币不在收回，欢迎热心交流。
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7楼2011-02-18 10:53:26
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qdeev

金虫 (正式写手)
★
dhd997(金币+1): 热心总有回报，欢迎多多交流。 2011-02-19 20:51:01
引用回帖:
Originally posted by dhd997 at 2011-02-18 02:53:26:
操作失误，多评的金币不在收回，欢迎热心交流。

对于守财奴的我来说，多给我两个钱，我很高兴，但是就不能换个说法。。。说是：回答的很精彩。。多赏了我点。。
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8楼2011-02-19 16:56:01
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ksnight

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by qdeev at 2011-02-18 00:13:51:
第一个问题是可以用。。
第二个问题是：据我所知，绝大多数的葡聚糖凝胶都是用它的分子筛效果，尤其是Sephadex LH 系列（在用甲醇的条件下）。。如果说是摸极性条件，主要是用TLC上来作为依据，或者直接上柱 ...

您对葡聚糖凝胶了解的比较多啊，

从来没有用过这种方法，有些问题不是很明白，再跟您请教一下。

如果我用水体系来过葡聚糖凝胶的柱子。1.如何确定哪种葡聚糖凝胶（市售的）才合适呢？ 2.如何确定展开剂，就用纯水就可以了？

TLC小板是硅胶板，可以模拟硅胶柱子的情况，来确定展开剂的比例。但应该不能用TLC板来确定葡聚糖凝胶的情况吧？因为是不同的作用机理啊，一个是吸附，一个事排阻。

请赐教，多谢了啊！
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9楼2011-02-21 09:40:32
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qdeev

金虫 (正式写手)
ksnight(金币+1): 2011-02-21 19:28:14
引用回帖:
Originally posted by ksnight at 2011-02-21 01:40:32:
您对葡聚糖凝胶了解的比较多啊，

从来没有用过这种方法，有些问题不是很明白，再跟您请教一下。

如果我用水体系来过葡聚糖凝胶的柱子。1.如何确定哪种葡聚糖凝胶（市售的）才合适呢？ 2.如何确定展开剂， ...

这个问题你如果去药学区提问，估计有更多的人回应你。。
1.买什么凝胶，主要看你化合物的分子量，看凝胶的适用范围。
比如:Sephadex LH-20
Exclusion limit:
peptides ~4 kD (~35 amino acids but depends on solvent in which the gel has been equilibrated.)
small organics ~5kD but depends on solvent in which the gel has been equilibrated.

2.凝胶柱据我所知，用你选的流动相直接上柱子，当然摸条件的时候只是用你部分样品。。等到摸到合适的条件再把全部品全上去。。虽然凝胶柱的样品吸附量小，但是也还是有损失的。

TLC只是有一定的参考作用，虽然主要分离作用不同，但还是有一定的参考。。只是这个参考作用要看你本身的经验了。
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10楼2011-02-21 18:58:22
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