应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】分光光度计测出的吸光值如何计算CAT,APX,POD？
51/1返回列表
查看: 4357  |  回复: 11
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

liujie2008

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】分光光度计测出的吸光值如何计算CAT,APX,POD？

用分光光度计测的CAT,APX,POD,吸光值如何转换成CAT,APX,POD的值啊？是不是先做出吸光值的线性分析，求出斜率，然后再用蛋白/斜率求值吗？我做的线性分析怎么得出的斜率都是0呢？求高手指点。谢了
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2011-02-15 22:01:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

凌波丽

专家顾问 (知名作家)
西瓜: 回帖置顶 2012-04-29 17:39:07
更正：4楼的计算公式没有打上去，请见8楼中文附件，6楼和7楼的过氧化氢的最大吸收峰不对！不是在290nm,而是240nm，当是转帖时没有仔细看，。
赞一下 回复此楼
9楼2012-04-29 12:59:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答

wqj1988926

金虫 (正式写手)
★ ★ ★
liujie2008(金币+1):谢谢参与
liujie2008(金币+1): 2011-02-16 09:13:05
dhd997(金币+2): 谢谢交流 2011-02-16 10:37:52
具体的公式我忘了，不需要做线性的，是通过一段时间酶催化底物反应后引起的紫外变化来求算酶的活力（注意酶单位的确定减少复杂程度）。具体的方法参考文献，CAT,APX,POD很多人做的
赞一下(2人) 回复此楼
2楼2011-02-16 08:50:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liujie2008

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by wqj1988926 at 2011-02-16 08:50:20:
具体的公式我忘了，不需要做线性的，是通过一段时间酶催化底物反应后引起的紫外变化来求算酶的活力（注意酶单位的确定减少复杂程度）。具体的方法参考文献，CAT,APX,POD很多人做的

谢谢了
回复此楼
3楼2011-02-16 09:13:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

凌波丽

专家顾问 (知名作家)
★ ★
liujie2008(金币+1): 谢谢参与
西瓜: 金币+1, 有现成的就不必浪费自己时间啦 2012-04-29 17:38:37
“ 过氧化氢酶的活力测定——紫外吸收法
一。原理：H2O2在240nm波长下有强烈吸收，过氧化氢酶能分解过氧化氢，使反应溶液吸光度(A240)随反应时间而降低。根据测量吸光率的变化速度即可测出过氧化氢酶的活力。
二。材料、仪器与试剂
        （一）、材料：小麦叶片
        （二）、仪器（仪器的选择在实验开始前由学生在预习报告中提出方案后教师审定）
        紫外分光光度计；离心机；研钵；250ml容量瓶1个；0.5ml刻度吸管2支，2ml刻度吸管1支；10ml试管3支；恒温水浴；
        （三）、试剂（试剂的选择在实验开始前由学生在预习报告中提出方案后教师审定后并配制）
0.2mol/L pH7.8磷酸缓冲液（内含1%聚乙烯吡咯烷酮）；0.1mol/L H2O2（用0.1mol/L高锰酸钾标定）。
三、实验操作：
        1.酶液提取：称取新鲜小麦叶片或其它植物组织0.5g置研钵中，加入2～3ml 4℃下预冷的pH7.0磷酸缓冲液和少量石英砂研磨成匀浆后，转入25ml容量瓶中，并用缓冲液冲洗研钵数次，合并冲洗液，并定容到刻度。混合均匀将量瓶置5℃冰箱中静置10min，取上部澄清液在4000rpm下离心15min，上清液即为过氧化氢酶粗提液。5℃下保存备用。
        2.测定：取10ml试管3支，其中2支为样品测定管，1支为空白管，按表40-2顺序加入试剂。
        表40-2  紫外吸收法测定H2O2样品液配置表
管  号        S0        S1        S2
粗酶液(ml)        0.2（煮死酶液）        0.2        0.2
pH7.8磷酸(ml)        1.5        1.5        1.5
蒸馏水(ml)        1.0        1.0        1.0
        25℃预热后,逐管加入0.3ml 0.1mol/L的H2O2，每加完一管立即记时，并迅速倒入石英比色杯中，240nm下测定吸光度，每隔1min读数1次，共测4min，待3支管全部测定完后，按下式计算酶活力。
五、计算
        以1min内A240减少0.1的酶量为1个酶活单位（u）。
    过氧化氢酶活力(u/gFW/min)=
        式中  A240 = AS0－
           AS0—加入煮死酶液的对照管吸光值；
           AS1, AS2—样品管吸光值；
           Vt—粗酶提取液总体积（ml）；
           V1—测定用粗酶液体积（ml）；
           FW—样品鲜重（g）；
           0.1—A240每下降0.1为1个酶活单位（u）；
           t—加过氧化氢到最后一次读数时间（min）。”
转自百度文库，我实在不喜欢打字。
赞一下 回复此楼
4楼2012-04-29 12:23:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭