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【分享】怎样选择离子交换填料
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离子交换填料的选择依据 离子交换填料的种类很多，离子交换层析要取得较好的效果首先要选择合适的离子交换填料。 首先是对离子交换填料电荷基团的选择，确定是选择阳离子交换填料还是选择阴离子交换填料。这要取决于被分离的物质在其稳定的pH 下所带的电荷，如果带正电，则选择阳离子交换填料；如带负电，离子交换填料则选择阴离子交换填料。例如待分离的蛋白等电点为4，稳定的pH 范围为6－9，由于这时蛋白带负电，故应选择阴离子交换填料进行分离。强酸或强碱型离子交换填料适用的pH 范围广，常用于分离一些小分子物质或在极端pH 下的分离。由于弱酸型或弱碱型离子交换填料不易使蛋白质失活，故一般分离蛋白质等大分子物质常用弱酸型或弱碱型离子交换填料。 其次是对离子交换填料基质的选择。前面已经介绍了，聚苯乙烯离子交换填料等疏水性较强的离子交换填料一般常用于分离小分子物质，如无机离子、氨基酸、核苷酸等。而纤维素、葡聚糖、琼脂糖等离子交换填料亲水性较强，适合于分离蛋白质等大分子物质。一般纤维素离子交换填料价格较低，但分辨率和稳定性都较低，适于初步分离和大量制备。葡聚糖离子交换填料的分辨率和价格适中，但受外界影响较大，体积可能随离子强度和pH 变化有较大改变，影响分辨率。琼脂糖离子交换填料机械稳定性较好，分辨率也较高，但价格较贵。 另外离子交换填料颗粒大小也会影响分离的效果。离子交换填料颗粒一般呈球形，颗粒的大小通常以目数(mesh)或者颗粒直径(mm)来表示，目数越大表示直径越小。前面在介绍交换容量时提到了一些关于交换剂颗粒大小、孔隙的选择。另外离子交换层析柱的分辨率和流速也都与所用的离子交换填料颗粒大小有关。一般来说颗粒小，分辨率高，但平衡离子的平衡时间长，流速慢；颗粒大则相反。所以大颗粒的离子交换填料适合于对分辨率要求不高的大规模制备性分离，而小颗粒的离子交换填料适于需要高分辨率的分析或分离。 这里特别要提到的是，离子交换纤维素目前种类很多，其中以DEAE-纤维素(二乙基氨基纤维素)和CM-纤维素(羧甲基纤维素)最常用，它们在生物大分子物质(蛋白质，酶，核酸等)的分离方面显示很大的优越性。一是它具有开放性长链和松散的网状结构，有较大的表面积，大分子可自由通过，使它的实际交换容量要比离子交换树脂大的多；二是它具有亲水性，对蛋白质等生物大分子物质吸附的不太牢，用较温和的洗脱条件就可达到分离的目的，因此不致引起生物大分子物质的变性和失活。三是它的回收率高。所以离子交换纤维素已成为非常重要的一类离子交换填料。 希望对您有帮助。  |
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henghuibio(金币+1):谢谢参与
dhd997(金币+2): 热心 2011-02-15 18:49:46
henghuibio(金币+1):谢谢参与
dhd997(金币+2): 热心 2011-02-15 18:49:46
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对离子树脂填料的选择，可以在以下连接中下载各种填料说明书看看 上海生工有各种树脂填料卖 产品编号SF001 SF002 SF003 SF004 SF.......... http://www.sangon.com/sqltest2.a ... =%20Fcode%20like%20'%25sf%' [ Last edited by xhjggl on 2011-2-16 at 16:21 ] |
2楼2011-02-15 18:49:27
3楼2011-02-16 11:39:03
4楼2011-02-16 14:54:25
5楼2011-03-30 11:53:14
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henghuibio(金币+1): 谢谢参与
送红花一朵
henghuibio(金币+1): 谢谢参与
送红花一朵 |
可以问几个问题吗？ 1.优越性那里，说纤维素较树脂有开放性长链和松散的网状结构，开放性长链优越在哪里？网状结构又具体优越在哪里ne？ 2.回收率高，回收率大概是多少哩？ 发自小木虫Android客户端 |
7楼2015-10-29 23:46:18
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2014-07-30 13:35
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henghuibio(金币+1): 谢谢参与
谢谢分享！