24小时热门版块排行榜    

查看: 5282  |  回复: 26

_然然

金虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by 猫咪胖胖 at 2011-02-13 22:23:25:
我PCR回收得到的片段,与T载体连接后转化摇菌提质粒后可以P出目的条带,但测序总显示是空载体,不知道怎么回事。
PMD-18T和T1-simple都试过。

如果你用m13引物p,两引物之间有一段载体序列,所以会有条带,你要比一下是不是跟你的目的条带相近,p出来的条带要比你的目的条带大一点就是引物间的载体序列。
21楼2011-03-19 23:20:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

2010_撒家

新虫 (初入文坛)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
我最近也是如此,PCR切胶纯化后,进行克隆,老是假阳性。重复多次,还是没有克隆出。原因到底在哪里,老是找不出。
22楼2011-03-20 12:49:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dingdingsky

铜虫 (初入文坛)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
首先确保你胶回收没有问题,其次的话去酶切验证一下吧
23楼2011-03-20 13:16:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhangxn2010

木虫 (著名写手)

让一切随风飞翔


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
送测样品是质粒还是菌液,怀疑污染了
一直向前!
24楼2011-03-20 19:32:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

vs570588

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
我觉得菌落PCR挺准的,用M13引物,再选个小一点的Marker,我前几天做克隆,全空载,用菌落PCR,Marker2000,做有条带,测序说全空载,我自己换了DL500marker,再做菌落后跑胶,果然几乎所有条带都是在200以下,因为得目的条带要200,理论上条带应该在200到300。所以我决定重新做。大家说克隆最关键的一部是啥?
25楼2011-03-20 20:29:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zgb1982

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
换测序公司吧,测序公司不一样可靠的,也是人在操作机器
26楼2011-03-20 20:34:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cdde1234

金虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
pcr试剂有可能被你污染了
27楼2015-06-26 15:12:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 猫咪胖胖 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 面上合作单位盖章 +6 ssyjh 2026-08-27 9/450 2026-09-01 20:01 by huagongfeihu
[基金申请] 面上函评意见出来了,像什么等级? 20+4 Tsingking1 2026-08-27 17/850 2026-09-01 19:51 by 超级无敌华子
[基金申请] 国社科又开始会评了,不知道这次命运如何 +7 雨打竹帘 2026-08-30 11/550 2026-08-31 23:16 by hittle2008
[基金申请] 基金未中,这种答复是模板吗? +6 zhaosm1982 2026-08-27 7/350 2026-08-31 21:18 by qdxxmc
[基金申请] 哪位高人中了,把查询到的截图贴出来让我看看,让我长长见识 +6 yuleib84 2026-08-26 7/350 2026-08-31 19:46 by 鱼翔浅底1
[基金申请] 面上意见出来了 +12 黄鸟于飞Chao 2026-08-29 23/1150 2026-08-31 18:57 by 黄鸟于飞Chao
[基金申请] 能否申诉? +7 echo8914667 2026-08-30 8/400 2026-08-31 17:00 by yihongxu
[基金申请] 中青基了要发朋友圈吗? +7 349506619 2026-08-28 7/350 2026-08-31 13:39 by 冼亮淀粉酶
[基金申请] 29号明天会评吗 +4 笨笨唐 2026-08-28 4/200 2026-08-31 09:30 by huixian257
[基金申请] 基金不中,共勉 +12 eulota 2026-08-26 12/600 2026-08-31 08:42 by ZJTJZ
[基金申请] 为什么到现在没收到通知? +5 tannykie 2026-08-29 5/250 2026-08-30 21:05 by purplejack
[基金申请] 有没有仍没收到信息的 +7 德尚中行 2026-08-27 8/400 2026-08-30 20:52 by purplejack
[基金申请] 2026年叶企孙基金 +4 bud_bud 2026-08-27 7/350 2026-08-29 07:23 by foolishmani
[基金申请] 基金系统什么内容也没有 30+4 winsaint 2026-08-27 9/450 2026-08-28 11:06 by maolC
[基金申请] 怎么查啊 +6 huang1991js 2026-08-26 6/300 2026-08-28 08:42 by winsaint
[基金申请] 看板上这么多中的,有点像50人群里49个人都是骗子的那种感觉…… +5 a089 2026-08-26 6/300 2026-08-27 14:05 by jonewore
[基金申请] 我不理解! +15 Edward_pc 2026-08-26 23/1150 2026-08-26 20:34 by zzuzxg
[基金申请] 系统进不去 +4 yanglien 2026-08-26 5/250 2026-08-26 11:10 by wenfengw83
[基金申请] 项目信息和经费信息在系统里都可以看到了 +6 wittyboy 2026-08-26 14/700 2026-08-26 10:55 by wittyboy
[基金申请] 牛来!米来!面来! +8 beefly 2026-08-26 8/400 2026-08-26 08:37 by xuzhipiao
信息提示
请填处理意见