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nancy1984

木虫 (小有名气)


[交流] 【求助】pH=3磷酸缓冲液配置,怎样加入三乙胺?

请教下各位:
计划配置0.08M, pH=3的PBS缓冲液0.6L为流动相
要加入0.5%的三乙胺,即3mL.
我计划是配置先称量一定质量的磷酸二氢钠水合液后配置0.6L 0.08M的磷酸二氢钠溶液,再加入3mL三乙胺,最后用磷酸调节至pH=3。
1.这个配置顺序对不对
2.购买三乙胺是用一般化学纯还是买HPLC级的呢?一般三乙胺是用来抑制拖尾封的,用量能减少吗?
3. 我分析时间在一个白天内,可否不加入抑制细菌试剂呢?

多谢啦~
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cpuyxj

金虫 (正式写手)


nancy1984(金币+2): 谢谢交流 2011-02-10 10:28:36
1、顺序对的呀
2、分析纯就可
3、不用加抑菌试剂,第二天重新配就是了
2楼2011-02-10 10:23:29
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xx小小xx

木虫 (著名写手)


nancy1984(金币+2): 谢谢交流 2011-02-10 11:20:43
你这样配出来的浓度并不准确
用将磷酸二氢钠调节至pH=3要加入大量的磷酸,因此实际浓度会大很多
另外,三乙胺也是比较强的碱,会消耗较多的盐酸

配酸性较强的磷酸盐缓冲液应该反过来,先配磷酸溶液,再用浓度比较大的磷酸和NaOH(大概1M)

如果要很准确的控制浓度,就得麻烦点,先分别配0.08M的磷酸和0.08M的磷酸二氢钠若干mL(分别都要加0.5%的三乙胺),然后按一定比例混合

另外,个人认为三乙胺加0.5%多了,我们一般只加0.1%的样子

[ Last edited by xx小小xx on 2011-2-10 at 11:05 ]
3楼2011-02-10 11:03:33
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nancy1984

木虫 (小有名气)


引用回帖:
Originally posted by xx小小xx at 2011-02-10 12:03:33:
你这样配出来的浓度并不准确
用将磷酸二氢钠调节至pH=3要加入大量的磷酸,因此实际浓度会大很多
另外,三乙胺也是比较强的碱,会消耗较多的盐酸

配酸性较强的磷酸盐缓冲液应该反过来,先配磷酸溶液,再用浓度 ...

非常感谢你的建议。

请问这句话怎么理解啊:

配酸性较强的磷酸盐缓冲液应该反过来,先配磷酸溶液,再用浓度比较大的磷酸和NaOH(大概1M)

是指先配置好0.08M的磷酸溶液0.6L,加入三乙胺后(0.1%),再加入然后再用NaOH(1M)调节至pH=3吗?

我查了下,选用0.1%三乙胺也可以的。
4楼2011-02-10 11:24:40
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xx小小xx

木虫 (著名写手)


nancy1984(金币+3): 非常感谢 2011-02-10 13:16:25
刚才打字的时候掉字了
基本上就是你理解的

就一般试样来说,盐浓度影响不大(生物活性物质和表面活性剂另当别论),pH也不一定要非常精确,只要每次用的一样就可以有重复性
所以我的习惯是计算各组成的用量,然后直接配置,很少用pH计调节
当然,个人做法不同,只要达到要求就可以了
5楼2011-02-10 12:03:13
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HotG

银虫 (正式写手)


nancy1984(金币+1): 谢谢交流~~ 2011-02-12 15:09:43
引用回帖:
Originally posted by xx小小xx at 2011-02-10 12:03:13:
刚才打字的时候掉字了
基本上就是你理解的

就一般试样来说,盐浓度影响不大(生物活性物质和表面活性剂另当别论),pH也不一定要非常精确,只要每次用的一样就可以有重复性
所以我的习惯是计算各组成的用量, ...

不用pH计怎么知道数值呢
6楼2011-02-10 15:17:01
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xx小小xx

木虫 (著名写手)


nancy1984(金币+1): 谢谢交流~ 2011-02-12 15:09:55
引用回帖:
Originally posted by HotG at 2011-02-10 15:17:01:

不用pH计怎么知道数值呢

根据平衡常数算,磷酸盐有现成的表可查
计算的误差一般可控制在0.1pH上下,而且重现性一般高于用pH计调节
7楼2011-02-10 17:38:49
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HotG

银虫 (正式写手)


引用回帖:
Originally posted by xx小小xx at 2011-02-10 17:38:49:

根据平衡常数算,磷酸盐有现成的表可查
计算的误差一般可控制在0.1pH上下,而且重现性一般高于用pH计调节

哦 是这样啊 好的 最近实验时试试
8楼2011-02-11 10:06:12
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xx小小xx

木虫 (著名写手)


nancy1984(金币+1): 谢谢交流~ 2011-02-12 15:10:06
引用回帖:
Originally posted by HotG at 2011-02-11 10:06:12:

哦 是这样啊 好的 最近实验时试试

算的时候一定记着要把三乙胺的量也算进去
9楼2011-02-11 12:52:53
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