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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 【求助】pH=3磷酸缓冲液配置，怎样加入三乙胺？
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nancy1984

木虫 (小有名气)

[交流] 【求助】pH=3磷酸缓冲液配置，怎样加入三乙胺？

请教下各位：
计划配置0.08M, pH=3的PBS缓冲液0.6L为流动相
要加入0.5%的三乙胺，即3mL.
我计划是配置先称量一定质量的磷酸二氢钠水合液后配置0.6L 0.08M的磷酸二氢钠溶液，再加入3mL三乙胺，最后用磷酸调节至pH=3。
1.这个配置顺序对不对
2.购买三乙胺是用一般化学纯还是买HPLC级的呢？一般三乙胺是用来抑制拖尾封的，用量能减少吗？
3. 我分析时间在一个白天内，可否不加入抑制细菌试剂呢？

多谢啦~
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1楼 2011-02-10 10:01:31
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cpuyxj

金虫 (正式写手)
nancy1984(金币+2): 谢谢交流 2011-02-10 10:28:36
1、顺序对的呀
2、分析纯就可
3、不用加抑菌试剂，第二天重新配就是了
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2楼2011-02-10 10:23:29
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xx小小xx

木虫 (著名写手)
nancy1984(金币+2): 谢谢交流 2011-02-10 11:20:43
你这样配出来的浓度并不准确
用将磷酸二氢钠调节至pH=3要加入大量的磷酸，因此实际浓度会大很多
另外，三乙胺也是比较强的碱，会消耗较多的盐酸

配酸性较强的磷酸盐缓冲液应该反过来，先配磷酸溶液，再用浓度比较大的磷酸和NaOH（大概1M）

如果要很准确的控制浓度，就得麻烦点，先分别配0.08M的磷酸和0.08M的磷酸二氢钠若干mL（分别都要加0.5%的三乙胺），然后按一定比例混合

另外，个人认为三乙胺加0.5%多了，我们一般只加0.1%的样子

[ Last edited by xx小小xx on 2011-2-10 at 11:05 ]
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3楼2011-02-10 11:03:33
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nancy1984

木虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by xx小小xx at 2011-02-10 12:03:33:
你这样配出来的浓度并不准确
用将磷酸二氢钠调节至pH=3要加入大量的磷酸，因此实际浓度会大很多
另外，三乙胺也是比较强的碱，会消耗较多的盐酸

配酸性较强的磷酸盐缓冲液应该反过来，先配磷酸溶液，再用浓度 ...

非常感谢你的建议。

请问这句话怎么理解啊：

配酸性较强的磷酸盐缓冲液应该反过来，先配磷酸溶液，再用浓度比较大的磷酸和NaOH（大概1M）

是指先配置好0.08M的磷酸溶液0.6L，加入三乙胺后(0.1%)，再加入然后再用NaOH(1M)调节至pH=3吗？

我查了下，选用0.1%三乙胺也可以的。
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4楼2011-02-10 11:24:40
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xx小小xx

木虫 (著名写手)
nancy1984(金币+3): 非常感谢 2011-02-10 13:16:25
刚才打字的时候掉字了
基本上就是你理解的

就一般试样来说，盐浓度影响不大（生物活性物质和表面活性剂另当别论），pH也不一定要非常精确，只要每次用的一样就可以有重复性
所以我的习惯是计算各组成的用量，然后直接配置，很少用pH计调节
当然，个人做法不同，只要达到要求就可以了
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5楼2011-02-10 12:03:13
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HotG

银虫 (正式写手)
nancy1984(金币+1): 谢谢交流~~ 2011-02-12 15:09:43
引用回帖:
Originally posted by xx小小xx at 2011-02-10 12:03:13:
刚才打字的时候掉字了
基本上就是你理解的

就一般试样来说，盐浓度影响不大（生物活性物质和表面活性剂另当别论），pH也不一定要非常精确，只要每次用的一样就可以有重复性
所以我的习惯是计算各组成的用量， ...

不用pH计怎么知道数值呢
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6楼2011-02-10 15:17:01
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xx小小xx

木虫 (著名写手)
nancy1984(金币+1): 谢谢交流~ 2011-02-12 15:09:55
引用回帖:
Originally posted by HotG at 2011-02-10 15:17:01:

不用pH计怎么知道数值呢

根据平衡常数算，磷酸盐有现成的表可查
计算的误差一般可控制在0.1pH上下，而且重现性一般高于用pH计调节
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7楼2011-02-10 17:38:49
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HotG

银虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by xx小小xx at 2011-02-10 17:38:49:

根据平衡常数算，磷酸盐有现成的表可查
计算的误差一般可控制在0.1pH上下，而且重现性一般高于用pH计调节

哦 是这样啊 好的 最近实验时试试
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8楼2011-02-11 10:06:12
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xx小小xx

木虫 (著名写手)
nancy1984(金币+1): 谢谢交流~ 2011-02-12 15:10:06
引用回帖:
Originally posted by HotG at 2011-02-11 10:06:12:

哦 是这样啊 好的 最近实验时试试

算的时候一定记着要把三乙胺的量也算进去
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9楼2011-02-11 12:52:53
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