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kaobo2012木虫 (正式写手)
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[交流]
【讨论】在测效价时，所用封闭蛋白的问题已有1人参与
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免疫动物后，在测动物效价时，所用的是ELISA实验，用的封闭蛋白，最好是小牛血清，但因为价格原因，一般都用脱脂奶粉，也有用干酪素的。奶粉易溶些，干酪素不易溶。这两种我都用过。 脱脂奶粉的浓度是5%，而干酪素是1%，而且，从价格上，干酪素更实惠些。 我想问下，在此用脱脂奶粉与干酪素还有其他区别吗？为什么有的实验室用脱脂奶粉，而有的用干酪素呢？请名位高人发表见解！ |
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木虫 (正式写手)
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小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
kaobo2012: 回帖置顶 2012-01-09 23:20:00
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kaobo2012: 回帖置顶 2012-01-09 23:20:00
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干酪素需要加入NAOH煮沸才能够溶解，而BSA也有本身的缺陷，可以用上海生工的以下产品 无蛋白封闭液 产品简介： 在常规的Western blot 和ELISA实验中，需要用封闭试剂将膜或酶标板孔中的未被抗原或抗体占据的位点进行进行封闭，通常的封闭试剂有BSA，脱脂奶粉等，但是BSA中有少量的抗体残留，导致抗原/抗体之间的交叉反应，产生高背景，杂带较多或使得本底水平增高，同样脱脂奶粉中含有少量的生物素和碱性磷酸酶残留，在使用生物素-亲和素系统和碱性磷酸酶标记的二抗时，也会使得高背景或本底水平增高，本产品采用化学合成的高分子聚合物，作为封闭试剂，从而避免了BSA，脱脂奶粉作为封闭试剂的缺陷，使得实验的结果更加精确，膜上的条带更加清晰，同时也不降低免疫印迹反应的灵敏度。 产品组成： PW040 2% 封闭试剂 500ML 180元 PW041 1% 封闭试剂in1XPBS 500ml 120元 PW042 1%封闭试剂in 1XTBS 500ml 120元 |
2楼2011-03-12 18:13:39