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听雪看山

木虫 (职业作家)

[交流] 【求助/交流】关于质粒上终止子的疑问

谁能帮我回答下，在载体质粒中，插入外源基因，什么情况下需要终止子，什么情况下不需要终止子呢？
质粒中是不是只能有一个终止子/terminator呢？
如果载体上有基因的转录终止子，那么是不是我要插入的基因片段就必须去掉TAA之类的终止密码子呢？


问题比较初级，但是希望有人能帮我解决个疑问，目前已经成功连接好了一个克隆质粒，插入基因里面携带者TAA密码子，但是又发现我用的质粒pYES2 有个CYC1 TT是转录终止子。因此，搞不清自己的这个质粒是错还是对了？
谢谢好心的人帮我回答
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1楼 2011-01-25 18:51:29
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shaquila

金虫 (正式写手)
★
rainwander(金币+1): 鼓励积极参与交流~~~ 2011-01-25 22:38:07
一般终止子比启动子来的宽松，就是在你cds后面加上一段序列，不需要考虑移码问题～～
这段序列和cds之间可以填充序列
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3楼2011-01-25 20:01:47
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shaquila

金虫 (正式写手)
★
听雪看山(金币+5): 谢谢，我的基础不好，很多概念混起来了。。。谢谢了，我的好好想想你说的 2011-01-25 20:02:54
rainwander(金币+1): 鼓励积极参与交流~~~ 2011-01-26 22:05:44
终止子和终止密码子是两个概念，终止密码子就是TAA，TGA啥的，它之和翻译有关系～～就像启动子和起始密码子的关系一样
终止子是转录终止元件，RNA polymerase到这个地方开始从模版上脱下，转录终止，表达载体上有多个终止子，例如目的基因的，筛选标记的，gus的，所以有多个，你要表达一个基因就要一个终止子，和启动子一样是必不可少的～～
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2楼2011-01-25 19:58:36
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听雪看山

木虫 (职业作家)
引用回帖:
Originally posted by shaquila at 2011-01-25 20:01:47:
一般终止子比启动子来的宽松，就是在你cds后面加上一段序列，不需要考虑移码问题～～
这段序列和cds之间可以填充序列


哦
我的插入基因是一段cDNA序列，现在有些明白你说的。。。不过还有些疑云，呵呵，多谢多谢
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4楼2011-01-25 20:12:56
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