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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【分享】强烈推介blue sliver染胶法
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水水726

新虫 (小有名气)

[交流] 【分享】强烈推介blue sliver染胶法 已有6人参与

因为手头没有G250，又想染胶看看，于是上网搜索发现blue sliver配制可用G250，试了下，效果真不错哇！
配方如下：
染液：
0.12%G250+10%硫酸铵+10%磷酸+20%甲醇
配制方法：30mlDDW+10ml磷酸将10g硫酸铵溶解，再加入0.12gG250溶解，最后加20ml甲醇和40mlDDW,总体积100ml
固定液：
40%甲醇+10%乙酸
使用方法：
1）固定：胶先置DDW中清洗下，再放入固定液，30min即可
2）水洗，10min,4次
3）染色：我一般过夜
4）去离子水清洗脱色

该法背景很干净，也不用配脱色液！
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1楼 2011-01-24 10:06:59
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horsw

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
还有一个protocol用的是硫酸铝而不是硫酸铵，时间可以更短，我用过，灵敏度背景都令人满意，就是不知道铝对后续质谱分析会不会有什么不良影响，有试过的朋友吗？分享下经验？
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9楼2011-01-26 15:43:08
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snoopyzxx

木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
感觉很模糊，不知道是不是拍照的原因。
另外能否贴下方法的来源？
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VX：19192310212；公众号：生物技术与IVD
2楼2011-01-24 12:28:38
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水水726

新虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by snoopyzxx at 2011-01-24 12:28:38:
感觉很模糊，不知道是不是拍照的原因。
另外能否贴下方法的来源？

手机拍的，像素不高，条带其实很清楚的
附件为protocol
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3楼2011-01-24 14:00:06
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biowandy

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by 水水726 at 2011-01-24 10:06:59:
因为手头没有G250，又想染胶看看，于是上网搜索发现blue sliver配制可用G250，试了下，效果真不错哇！
配方如下：
染液：
0.12%G250+10%硫酸铵+10%磷酸+20%甲醇
配制方法：30mlDDW+10ml磷酸将10g硫酸铵溶解， ...

你开头说没有g250  ,后面你又用了G250，不是很明白你在说啥
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4楼2011-01-24 14:05:40
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