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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】硫酸铵沉淀蛋白
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kong10

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】硫酸铵沉淀蛋白 已有9人参与

提取酶时，采用硫酸铵沉淀，然后离心，但买看到蛋白，请问是哪里出现问题，离心速度一般要多大，还有整个沉淀操作过程中需要注意什么，样品量少，缓冲液也就几ml，非常感谢！
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1楼 2011-01-12 22:58:32
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弦上的梦99

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
9楼: Originally posted by simiao8793 at 2011-01-14 12:36:19
我之前做过硫酸铵分级沉淀蛋白，也是80％，在4℃过夜沉淀，离心转速10000rpm,5min，效果很好

要过夜沉淀啊，不需要搅拌吗
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13楼2015-02-01 12:12:22
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

文献杰出贡献
加了多少硫酸铵呢？
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The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
2楼2011-01-12 23:54:41
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kong10

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by brightfuture01 at 2011-01-12 23:54:41:
加了多少硫酸铵呢？

80%饱和度，我从叶片提取，叶绿素含量太大，都不知道蛋白在哪，溶液不会变澄清吗？就是上清
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3楼2011-01-13 18:08:37
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chaoen

木虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
rainwander(金币+1):欢迎参与讨论~~~ 2011-01-13 20:12:08
最近我也在做硫酸铵沉淀，大家一起讨论讨论
当加到80%的SAS应该很容易看到有悬浮物了吧，是不是可以直接视觉角度可以判断的啊？
如果是测定蛋白觉得没有的话，说明蛋白检测方法和叶绿素有干扰吧
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4楼2011-01-13 19:44:17
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