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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】请各位赐教
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yananjizhu

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】请各位赐教 已有2人参与

各位虫友好，我一直在做westernblot但是一直做不好，对western的东西了解的很少，请教大家有没好的资料，书，或者网站介绍给我，谢谢，多多帮忙哈
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1楼 2011-01-11 23:25:29
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
scelab(金币+3): huhu 2011-01-17 01:11:49
绝大多数蛋白，用恒压湿转1~2.5h就完全了
一抗一般4度过夜
二抗一般室温1h

去看看分子克隆指南吧，入门必备
然后可以去看看比如abcam公司的技术资料
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3楼2011-01-16 23:24:47
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yananjizhu

新虫 (初入文坛)

westernblot的转膜，电泳

你好，我想问下，westernblot的转膜电压，电流是怎么确定的，还有时间，一抗，二抗孵育时间怎么定呀，谢谢，或者介绍我看些书，或者有用的网站，关于以上内容的，谢谢了
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2楼2011-01-16 23:20:03
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yananjizhu

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2011-01-16 23:24:47:
绝大多数蛋白，用恒压湿转1~2.5h就完全了
一抗一般4度过夜
二抗一般室温1h

去看看分子克隆指南吧，入门必备
然后可以去看看比如abcam公司的技术资料

谢谢， 我还想问下，那转膜的电压电流怎么计算呀
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4楼2011-01-18 22:55:49
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by yananjizhu at 2011-01-18 22:55:49:

谢谢， 我还想问下，那转膜的电压电流怎么计算呀

一般我们用恒压100V
如果遇到大蛋白，比如200KD以上的，会试试低压过夜，这个电压就得你自己摸索了，三四十伏左右
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5楼2011-01-18 23:20:37
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