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yananjizhu

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】请各位赐教 已有2人参与

各位虫友好,我一直在做westernblot但是一直做不好,对western的东西了解的很少,请教大家有没好的资料,书,或者网站介绍给我,谢谢,多多帮忙哈
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yananjizhu

新虫 (初入文坛)

westernblot的转膜,电泳

你好,我想问下,westernblot的转膜电压,电流是怎么确定的,还有时间,一抗,二抗孵育时间怎么定呀,谢谢,或者介绍我看些书,或者有用的网站,关于以上内容的,谢谢了
2楼2011-01-16 23:20:03
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
scelab(金币+3): huhu 2011-01-17 01:11:49
绝大多数蛋白,用恒压湿转1~2.5h就完全了
一抗一般4度过夜
二抗一般室温1h

去看看分子克隆指南吧,入门必备
然后可以去看看比如abcam公司的技术资料
3楼2011-01-16 23:24:47
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yananjizhu

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2011-01-16 23:24:47:
绝大多数蛋白,用恒压湿转1~2.5h就完全了
一抗一般4度过夜
二抗一般室温1h

去看看分子克隆指南吧,入门必备
然后可以去看看比如abcam公司的技术资料

谢谢, 我还想问下,那转膜的电压电流怎么计算呀
4楼2011-01-18 22:55:49
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by yananjizhu at 2011-01-18 22:55:49:

谢谢, 我还想问下,那转膜的电压电流怎么计算呀

一般我们用恒压100V
如果遇到大蛋白,比如200KD以上的,会试试低压过夜,这个电压就得你自己摸索了,三四十伏左右
5楼2011-01-18 23:20:37
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