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【求助/交流】RNA提取策略说“一定要保证电泳体系中有少量的RNAase存在”。这是为什么
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xnbioinfor
铜虫
(小有名气)
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(幼儿园)
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帖子: 255
在线: 35.9小时
虫号: 952726
[交流]
【求助/交流】RNA提取策略说“一定要保证电泳体系中有少量的RNAase存在”。这是为什么
原句是这样的“一般的琼脂糖凝胶电泳,注意不要用甲醛变性电泳(又不是做northern,实在没有必要)。
电泳槽注意一定不要用DEPC处理,一定要保证电泳体系中有少量的RNAase存在
。分别在加样孔中加入1,2,3μlRNA抽提溶液。在旁边加入DNA marker。1%琼脂糖凝胶,10V/cm的电压,电泳10min成像一次,看电泳情况,如果28s和18s还没拉开,继续电泳10min成像,如果任没有拉开再次电泳5min。如果还没有分开多半28s已经遭到破坏,不可能看到典型的3条带了。”
为什么要有RNAase存在,这样不会导致电泳过程中RNA降解吗?
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1楼
2011-01-04 19:47:15
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cdl007
木虫
(正式写手)
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(小学生)
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金币: 2570.6
帖子: 545
在线: 123.1小时
虫号: 275133
★
小木虫(金币
+0.5
):给个红包,谢谢回帖
可以不用甲醛,但是一定要有rnase。。。不通
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9楼
2011-12-16 21:24:11
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jurkat.1640
至尊木虫
(文坛精英)
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(博后)
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帖子: 14627
在线: 2208.3小时
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★
xnbioinfor(金币
+1
):谢谢参与
原文真的是这样写的吗
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2楼
2011-01-05 17:19:34
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thinkingers
金虫
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(幼儿园)
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帖子: 265
在线: 116.9小时
虫号: 912060
★
xnbioinfor(金币
+1
):谢谢参与
引用回帖:
不可能看到典型的3条带了
什么文章啊~~~除非降解得非常厉害,一般只要按照标准过程,都会出现3条带的,还有DNA Marker也完全没有必要,又不需要看大小,至少我是这样子的。
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4楼
2011-01-05 21:49:43
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genetics183
木虫
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帖子: 832
在线: 185.1小时
虫号: 469665
★
xnbioinfor(金币
+1
):谢谢参与
原文有误,不可尽信书本。
本人这两天仔细查看国外某一著名数据库,也发现了少量文字错误。
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5楼
2011-01-05 22:03:32
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rainwander
3楼
2011-01-05 18:03
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xnbioinfor(金币
+1
):谢谢参与
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