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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】RNA提取策略说“一定要保证电泳体系中有少量的RNAase存在”。这是为什么
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xnbioinfor

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】RNA提取策略说“一定要保证电泳体系中有少量的RNAase存在”。这是为什么

原句是这样的“一般的琼脂糖凝胶电泳，注意不要用甲醛变性电泳（又不是做northern，实在没有必要）。电泳槽注意一定不要用DEPC处理，一定要保证电泳体系中有少量的RNAase存在。分别在加样孔中加入1，2，3μlRNA抽提溶液。在旁边加入DNA marker。1%琼脂糖凝胶，10V/cm的电压，电泳10min成像一次，看电泳情况，如果28s和18s还没拉开，继续电泳10min成像，如果任没有拉开再次电泳5min。如果还没有分开多半28s已经遭到破坏，不可能看到典型的3条带了。”
为什么要有RNAase存在，这样不会导致电泳过程中RNA降解吗？
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1楼 2011-01-04 19:47:15
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thinkingers

金虫 (小有名气)
★
xnbioinfor(金币+1):谢谢参与
引用回帖:
不可能看到典型的3条带了

什么文章啊～～～除非降解得非常厉害，一般只要按照标准过程，都会出现3条带的，还有DNA  Marker也完全没有必要，又不需要看大小，至少我是这样子的。
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4楼2011-01-05 21:49:43
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)
★
xnbioinfor(金币+1):谢谢参与
原文真的是这样写的吗
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2楼2011-01-05 17:19:34
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genetics183

木虫 (正式写手)
★
xnbioinfor(金币+1):谢谢参与
原文有误，不可尽信书本。
本人这两天仔细查看国外某一著名数据库，也发现了少量文字错误。
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5楼2011-01-05 22:03:32
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cdl007

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
可以不用甲醛，但是一定要有rnase。。。不通
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9楼2011-12-16 21:24:11
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rainwander3楼
2011-01-05 18:03   回复  
xnbioinfor(金币+1):谢谢参与
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