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【求助/交流】RNA降解问题求赐教
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钟心碧
金虫
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心碧
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性别:
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专业: 生物大分子结构与功能
[交流]
【求助/交流】RNA降解问题求赐教
已有14人参与
提取的RNA老是降解,在其中如果加入Rnase inhibitors可以放多久呢?请各位大侠赐教!
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灵魂是否存在
1楼
2010-12-31 10:21:49
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manniecute
新虫
(初入文坛)
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(幼儿园)
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专业: 抗肿瘤药物药理
★
小木虫(金币
+0.5
):给个红包,谢谢回帖
你好 ,我前几天提了RNA准备做RT-PCR。可是测浓度的说话发现RNA浓度都太低了,才200多ng。。。请问我还可以做下去吗?
我以前提过都没有问题,浓度都有2000多ng 呢 。这几次不知道是啥原因,崩溃了。。。
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15楼
2011-12-29 11:42:07
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jhu132llh
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大洪
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小木虫(金币
+0.5
):给个红包,谢谢回帖交流
dhd997(金币+5):good 2010-12-31 14:44:00
RNA是很容易降解的
首先要解决为什么RNA降解的问题
1.提RNA的时候要勤换手套,代口罩。。。注意环境中RNA酶的污染
2.提RNA动作要快,整个过程越快越好
3.回融的时候注意点别污染RNA酶
4.提取完后尽快-80度保存,尽快做RT-PCR成cDNA -20度保存。
5.RNA中加Rnase inhibitors后应该还是在-80度保存。保存时间倒是我们试过快一年半的RNA(-80度保存),倒是还能用。
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青春的岁月,我们身不由己,只因这胸中燃烧的梦想!
2楼
2010-12-31 11:54:01
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jerry110
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★
小木虫(金币
+0.5
):给个红包,谢谢回帖交流
同意楼上的观点,我也好好学学
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3楼
2010-12-31 12:18:36
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jurkat.1640
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小木虫(金币
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rainwander(金币+1):鼓励积极参与~~~ 2010-12-31 17:09:12
最好一、二天内做掉实验,即使没有RNA酶,RNA本身也不稳定。
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4楼
2010-12-31 15:18:20
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