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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】【求助】考马斯亮蓝测蛋白出现絮状沉淀
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liliinjn

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】【求助】考马斯亮蓝测蛋白出现絮状沉淀 已有8人参与

RT
用考马斯亮蓝测Tris-HCl 提取的植物组织中的蛋白含量 为什么加入考马斯亮蓝后会出现絮状沉淀  静置一段时间后明显蓝色的絮状沉淀沉积在下层
急啊、、、、
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1楼 2010-12-28 13:37:28
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liliinjn

金虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by liliinjn at 2010-12-29 16:14:09:
谢谢 都试过了 都稀释到跟空白一样的颜色了 还是能看到有小颗粒
怕是疏水蛋白或粘性蛋白还加了氢氧化钠 都没能改变、、、

没有呢 MM测的是一个什么样的蛋白溶液？ 我用的tris-HCl  不知道是不是样品中其他组分的影响
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11楼2011-11-01 13:23:08
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susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
amisking(金币+1):鼓励交流！ 2010-12-28 19:35:11
我记得做的时候放很长时间时才会出现沉淀，刚反应是不会有沉淀的，反应10 min后就可以测吸光值了。
赞一下(2人) 回复此楼
Thank-you，so-blue.
2楼2010-12-28 14:06:18
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liliinjn

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by susizheng at 2010-12-28 14:06:18:
我记得做的时候放很长时间时才会出现沉淀，刚反应是不会有沉淀的，反应10 min后就可以测吸光值了。

我刚加进去就开始有沉淀了  很明显的、、、、
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3楼2010-12-28 15:40:56
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xhjggl

木虫 (正式写手)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
amisking(金币+2):鼓励交流！ 2010-12-28 19:35:19
说明所提取的蛋白质疏水性比较强,可以使用上海生工的改良型Bradford蛋白定量试剂盒.
Modified Bradford Protein Assay Kit
改良型Bradford蛋白浓度测定试剂盒       
产品说明：在使用常规Bradford试剂进行蛋白定量时，考马斯亮兰G-250染料分子之间，以及G-250与蛋白质复合物之间会发生聚集，随着时间的延长，产生可见的易沉降的颗粒，使得在595nm处测定的吸光度值A595时，蛋白质浓度的定量偏低。针对此种情况，本试剂盒通过添加特殊的试剂，使得考马斯亮兰G-250染料分子之间，以及G-250与蛋白质复合物在30分钟内不容易发生沉降，从而提高了测量结果的准确性。使得大量样品的定量变的从容不迫。
产品特点：
1.在30分钟内，G-250染料分子和G-250与蛋白质复合物不容易发生沉淀；
2.无论是分光光度法或酶标板法都有大小两种定量范围的操作方法；
3.还能够适应疏水的膜或粘蛋白的定量；
4.比较合适于从容不迫地进行大量样品的定量；
5.与常规的Bradford法相比，线形关系更佳，保证了结果的准确性。
编号        包装        价格        产地
SK3041        1000 Assays        360        生工
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4楼2010-12-28 16:12:53
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