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【求助/交流】请教:为什么我的乙酰胆碱酯酶在400nm处没有紫外吸收?
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liutaoliu
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【求助/交流】请教:为什么我的乙酰胆碱酯酶在400nm处没有紫外吸收?
为什么我的乙酰胆碱酯酶在400nm处没有紫外吸收?条件:pH7,PBS;0.02U/uL,请高手指点,谢谢!
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2010-12-23 20:34:27
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liutaoliu
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Originally posted by
brightfuture01
at 2010-12-24 10:46:02:
以乙酰硫代胆碱(AsCh)为底物,在乙酰胆碱酯酶(AChE)的作用下乙酰硫代胆碱(AsCh)水解成硫代胆碱和乙酸,硫代胆碱和二硫双对硝基苯甲酸(DTNB)产生显色反应,使反应液呈黄色,在分光光度计410nm处有最 ...
好的,我们的目的是想表征酶与某一材料结合后活性未发生太大变化,我看一般都是以ACHE峰位置变化不大来表明,要是看DTNB的峰的话,理论上峰位置应该固定的,只是强度变化。谢谢了!
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2010-12-24 11:46:18
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dhd997(金币+1):鼓励交流 2010-12-24 10:20:56
liutaoliu(金币+3):谢谢 2010-12-31 08:09:25
你不会是没有加底物就去测吸收值吧?蛋白的吸收峰往往在280nm处。
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2010-12-23 20:37:47
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dhd997(金币+1):鼓励交流 2010-12-24 10:20:45
liutaoliu(金币+3):谢谢 2010-12-31 08:09:44
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liutaoliu
at 2010-12-23 20:34:27:
为什么我的乙酰胆碱酯酶在400nm处没有紫外吸收?条件:pH7,PBS;0.02U/uL,请高手指点,谢谢!
你测的是乙酰胆碱酯酶,还是酶反应的产物啊?
酶的话,蛋白质,吸收峰280nm
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3楼
2010-12-23 20:40:25
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brightfuture01
at 2010-12-23 20:37:47:
你不会是没有加底物就去测吸收值吧?蛋白的吸收峰往往在280nm处。
谢谢回复,但我看文献上就是测的酶的啊(见下图),一直没搞明白。请问您测过吗?是测的底物氯化乙酰硫代胆碱吗?是的话,它的峰在哪儿?谢谢
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4楼
2010-12-24 09:45:35
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