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shiyancainan

银虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
图片显示你的样品中有些没有提好,DNA很少。粘稠可能是糖类等杂质多,或者是DNA很多,你的应该是杂质很多。你可以重新提提看,然后测一下它的吸光度,计算出核酸含量。一般一个体系中加10-30ng的DNA应该够用了。祝好运
21楼2010-12-23 22:03:51
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adslye

银虫 (正式写手)

★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
scelab(金币+5):很给力 2010-12-23 23:32:24
引用回帖:
Originally posted by 独孤蚕 at 2010-12-23 21:07:26:



左边是模板DNA;右边是扩增的,好像只有基因组DNA,产物很淡,肉眼看几乎可以忽 ...

蛋白污染太严重了,酚氯仿处理,然后再氯仿处理一遍。乙醇回收。操作知道的吧。

你的点样孔很亮,说明蛋白很多~~~
22楼2010-12-23 22:05:53
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adslye

银虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by adslye at 2010-12-23 22:05:53:



蛋白污染太严重了,酚氯仿处理,然后再氯仿处理一遍。乙醇回收。操作知道的吧。

你的点样孔很亮,说明蛋白很多~~~

另外,一定要点marker,不要偷懒,不要省,有时候条带奇怪的时候,是第一个分析依据。
23楼2010-12-23 22:07:34
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阳光金鱼唐

金虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by 独孤蚕 at 2010-12-23 22:03:51:

那能不能教我一下,孔里为什么跑不干净啊?我也不知道我点样手法哪里错了,新手就是什么都熟悉啊!

这个说不清楚,反正我点就没有,我师妹刚开始点每次都这样
不知道什么是生活了,也不知道生活是什么了
24楼2010-12-23 22:39:00
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独孤蚕

铁杆木虫 (著名写手)

rainwander:欢迎常来~~~~ 2010-12-23 23:43:09
谢谢这么多朋友帮忙啊!小木虫里的虫友真好,我先换上小木虫了,哈哈。
25楼2010-12-23 22:42:48
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nutplay

新虫 (初入文坛)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
是不是模板浓度太高了,我用试剂盒的,50ul的体系,模板只加1ul啊。
26楼2010-12-28 10:04:52
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独孤蚕

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
Originally posted by nutplay at 2010-12-28 10:04:52:
是不是模板浓度太高了,我用试剂盒的,50ul的体系,模板只加1ul啊。

看好多人说浓度太高不好,我也这样觉得。PCR怎么也是很灵敏的啊,模板稀释好多倍也没问题的啊,不过我一直做不出来。这几天就直接拿原液P,老天竟然让我P出来了,效果很好。可能我溶解DNA时水加的本来就是很多,所以浓度也不是很高,但还是没有搞清楚为什么会这样,虽然是P出来了。
27楼2010-12-30 22:46:13
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tryingtimes

金虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
我做PCR也是一样的条件 有时候能跑出来,有时候不行,我也不知道是什么原因!我的是25ul的体系,加1.5ul的DNA 所以我觉得你的模板浓度太高了!
没完没了
28楼2010-12-30 23:44:19
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tryingtimes

金虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by 阳光金鱼唐 at 2010-12-23 21:57:34:
你点样有问题,一看就是新手,做分子实验不久的,跟我师妹一样,孔里的东西跑不干净

敢问大虾能否不吝指教啊!或者有些好的分享和技巧共享下啊!小虫也是新手,也在跑PCR 点样手法也一般般!在此谢过啦~
没完没了
29楼2010-12-30 23:53:13
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阳光金鱼唐

金虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by tryingtimes at 2010-12-30 23:53:13:

敢问大虾能否不吝指教啊!或者有些好的分享和技巧共享下啊!小虫也是新手,也在跑PCR 点样手法也一般般!在此谢过啦~

饿不是大虾,饿是女的。也没什么技巧,点多了就好了
不知道什么是生活了,也不知道生活是什么了
30楼2010-12-31 12:10:56
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