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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】求细菌16S rDNA PCR的反应条件
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greatsaint

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】求细菌16S rDNA PCR的反应条件 已有2人参与

求以27F/1492R为引物扩增细菌16S rDNA全长的 PCR的反应条件。前期做了几次都很成功，但是最近几次怎么也p不出来，不知道什么原因。请各位不妨告知。谢谢！
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1楼 2010-12-21 16:27:52
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

文献杰出贡献
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
rainwander(金币+2):鼓励积极参与~~~ 2010-12-21 19:08:41
1、94  5min

2、94   1min

3、55   1min

4、72   1.5 min

2-4 30 cycle

5、 72   8min

6、 16度 恒定

一直这么做，只要DNA提取过关，没啥问题。

总DNA提取出来要分装，不要冻融次数太多了，多了会出现扩增不出来的现象。
赞一下(2人) 回复此楼
The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
2楼2010-12-21 16:36:07
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darymellon

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引物是不是时间长了，或是污染了？你换一管引物试试了没？
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2010-12-21 16:36:47
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