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rioarsenal

金虫 (正式写手)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
dhd997(金币+2):很活跃,注意休息。 2010-12-21 08:29:24
1,原料加量

2,rna样品浓缩
11楼2010-12-21 03:21:15
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chendarid0

银虫 (初入文坛)

好的 谢谢 样品浓缩的含义是这样吗

引用回帖:
Originally posted by rioarsenal at 2010-12-21 03:21:15:
1,原料加量

2,rna样品浓缩

好的 谢谢指教   样品浓缩是指离心去上清,要下面的部分 是吧
三人行必有我师
12楼2010-12-21 11:20:49
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chendarid0

银虫 (初入文坛)

好的 谢谢 我提的是全血RNA

引用回帖:
Originally posted by 宁夏8083 at 2010-12-20 21:45:16:
你提的是全血RNA?可是一般的都是替PBMC或白细胞的RNA啊。要是这样的话,你可以把红细胞裂解以后将白细胞收集到一个EP管中再提,Trizol的量不能太少,否则会影响RNA的提取效率的。如果是提取血浆中的病毒RNA,那你 ...

我提的是全血RNA,没有白细胞,红细胞这么复杂,只要按照正常的提取就可以了,要求不高的。我想也按照正常组织那样液氮研磨提取,或许会好一些
三人行必有我师
13楼2010-12-21 11:22:42
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rioarsenal

金虫 (正式写手)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
silicare(金币+1):谢谢参与 2010-12-22 11:45:05
引用回帖:
Originally posted by chendarid0 at 2010-12-21 11:20:49:

好的 谢谢指教   样品浓缩是指离心去上清,要下面的部分 是吧

对,RNA可以用异丙醇或无水乙醇沉淀的,具体方法可见《分子克隆》,或者invitrogen 公司trizol试剂的说明书,都有操作步骤
14楼2010-12-21 13:09:32
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chendarid0

银虫 (初入文坛)

谢谢 我晓得了

引用回帖:
Originally posted by rioarsenal at 2010-12-21 13:09:32:



对,RNA可以用异丙醇或无水乙醇沉淀的,具体方法可见《分子克隆》,或者invitrogen 公司trizol试剂的说明书,都有操作步骤

谢谢啊
三人行必有我师
15楼2010-12-22 11:24:29
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bigboy123

铜虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
换份浓度高的样本去做呀
供应PCR增量剂
16楼2010-12-22 13:47:31
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fzwish20000

新虫 (初入文坛)

博奥生物芯片北京国家工程研究中心:
我们比较了不同公司的产品后,认为北京百泰克生物公司生产的TRI pure LS Reagent用于全血有核细胞的RNA抽提效果较好,可以满足基因表达谱芯片的分析要求。一般1ml的全血可以得到10μg左右的total RNA,足够满足芯片分析的需要。

在临床上采血时,可以先把TRI pure LS Reagent分装750ul到1.5ml的离心管中。血液样本可以先抗凝处理(EDTA抗凝或者其他抗凝方式都可),然后取250ul全血样品加入到750ul的TRI pure LS Reagent中,用移液枪反复抽打并振荡混匀,在室温裂解5min-10min,直至血细胞充分发生裂解。然后可把此裂解液保存在-20℃下可达2个月,-80℃可达半年。在此期间,可以把该裂解液运输到博奥生物公司进行RNA的抽提,运输过程可以4℃ 1天,-20℃ 一周。
17楼2011-06-15 17:26:44
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