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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药理学 » 【求助】小鼠各个器官的组织匀浆怎么制备
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yangsitao

铁虫 (正式写手)

[交流] 【求助】小鼠各个器官的组织匀浆怎么制备

想要做小鼠的药物组织分布，可是不知道该怎么制备各个器官的组织匀浆？
各位大侠能否给点具体的制备方法。就是这么怎么制备需要注意什么事项
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1楼 2010-12-16 18:25:40
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王品三

铁杆木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
1、取肝脏1g，在冰冷的生理盐水中漂洗，除去血液，滤纸拭干，称重，放入5或10ml的小烧杯内
2、用移液管量取0.86％冷生理盐水，生理盐水的体积总量应该是组织块重量的9倍，用移液管或移液器取总量的2/3的匀浆介质或生理盐水于烧杯中，用眼科小剪尽快剪碎组织块（天然时操作要在冰水浴中进行，将盛有组织的小烧杯放入冰水中）。
3、手工匀浆：将剪碎的组织倒入玻璃匀浆管中，再将剩余的1/3匀浆介质或生理盐水冲洗残留在烧杯中的碎组织块，一起倒入匀浆管中进行匀浆，左手持匀浆管将下端插入盛有冰水混合物的器皿中，右手将捣杆垂直插入套管中，上下转动研磨数十次（6～8分钟），充分研碎，使组织匀浆化。
4、将制备好的10％匀浆用普通离心机或低温低速离心机3000r/min左右离心10～15分钟，若检测ATP酶，则只需要1000转/分，离心5分钟，将离心好的匀浆留下上清弃下面沉淀。
根据你的实验需要，取适量上清夜进行各种测定。
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12楼2012-06-15 14:56:49
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wld200106

禁虫 (著名写手)
本帖内容被屏蔽
2楼2010-12-16 18:48:30
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yll120166

木虫 (正式写手)
★
karl2100(金币+1):谢谢回帖！ 2010-12-16 22:21:45
yangsitao(金币+2):可不可具体点，我从来没做过，比如具体步骤什么来的， 2010-12-16 22:30:53
按一定的比例加生理盐水，用组织匀浆机制备匀浆，具体比例自己根据试验定。
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3楼2010-12-16 19:24:45
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点点爱滴滴

金虫 (正式写手)
大学实验基本上都是用玻璃匀浆器进行匀浆的
不知道有没有误差
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4楼2010-12-16 23:44:57
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