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yangsitao

铁虫 (正式写手)

应助: 1 (幼儿园)
金币: 17.9
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虫号: 613521

[交流] 【求助】小鼠各个器官的组织匀浆怎么制备

想要做小鼠的药物组织分布，可是不知道该怎么制备各个器官的组织匀浆？
各位大侠能否给点具体的制备方法。就是这么怎么制备需要注意什么事项

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1楼 2010-12-16 18:25:40

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王品三

铁杆木虫 (正式写手)

应助: 13 (小学生)
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虫号: 1151067

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖

1、取肝脏1g，在冰冷的生理盐水中漂洗，除去血液，滤纸拭干，称重，放入5或10ml的小烧杯内
2、用移液管量取0.86％冷生理盐水，生理盐水的体积总量应该是组织块重量的9倍，用移液管或移液器取总量的2/3的匀浆介质或生理盐水于烧杯中，用眼科小剪尽快剪碎组织块（天然时操作要在冰水浴中进行，将盛有组织的小烧杯放入冰水中）。
3、手工匀浆：将剪碎的组织倒入玻璃匀浆管中，再将剩余的1/3匀浆介质或生理盐水冲洗残留在烧杯中的碎组织块，一起倒入匀浆管中进行匀浆，左手持匀浆管将下端插入盛有冰水混合物的器皿中，右手将捣杆垂直插入套管中，上下转动研磨数十次（6～8分钟），充分研碎，使组织匀浆化。
4、将制备好的10％匀浆用普通离心机或低温低速离心机3000r/min左右离心10～15分钟，若检测ATP酶，则只需要1000转/分，离心5分钟，将离心好的匀浆留下上清弃下面沉淀。
根据你的实验需要，取适量上清夜进行各种测定。