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【求助】小鼠各个器官的组织匀浆怎么制备
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yangsitao
铁虫
(正式写手)
应助: 1
(幼儿园)
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帖子: 402
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虫号: 613521
[交流]
【求助】小鼠各个器官的组织匀浆怎么制备
想要做小鼠的药物组织分布,可是不知道该怎么制备各个器官的组织匀浆?
各位大侠能否给点具体的制备方法。就是这么怎么制备需要注意什么事项
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1楼
2010-12-16 18:25:40
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王品三
铁杆木虫
(正式写手)
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帖子: 554
在线: 130.6小时
虫号: 1151067
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
1、取肝脏1g,在冰冷的生理盐水中漂洗,除去血液,滤纸拭干,称重,放入5或10ml的小烧杯内
2、用移液管量取0.86%冷生理盐水,生理盐水的体积总量应该是组织块重量的9倍,用移液管或移液器取总量的2/3的匀浆介质或生理盐水于烧杯中,用眼科小剪尽快剪碎组织块(天然时操作要在冰水浴中进行,将盛有组织的小烧杯放入冰水中)。
3、手工匀浆:将剪碎的组织倒入玻璃匀浆管中,再将剩余的1/3匀浆介质或生理盐水冲洗残留在烧杯中的碎组织块,一起倒入匀浆管中进行匀浆,左手持匀浆管将下端插入盛有冰水混合物的器皿中,右手将捣杆垂直插入套管中,上下转动研磨数十次(6~8分钟),充分研碎,使组织匀浆化。
4、将制备好的10%匀浆用普通离心机或低温低速离心机3000r/min左右离心10~15分钟,若检测ATP酶,则只需要1000转/分,离心5分钟,将离心好的匀浆留下上清弃下面沉淀。
根据你的实验需要,取适量上清夜进行各种测定。
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12楼
2012-06-15 14:56:49
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wld200106
禁虫
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2楼
2010-12-16 18:48:30
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yll120166
木虫
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帖子: 319
在线: 51.2小时
虫号: 659840
★
karl2100(金币+1):谢谢回帖! 2010-12-16 22:21:45
yangsitao(金币+2):可不可具体点,我从来没做过,比如具体步骤什么来的, 2010-12-16 22:30:53
按一定的比例加生理盐水,用组织匀浆机制备匀浆,具体比例自己根据试验定。
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3楼
2010-12-16 19:24:45
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金虫
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虫号: 1156562
大学实验基本上都是用玻璃匀浆器进行匀浆的
不知道有没有误差
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4楼
2010-12-16 23:44:57
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