24小时热门版块排行榜    

查看: 2541  |  回复: 33

feiye2214

木虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by guoxingjun2008 at 2010-12-10 11:58:40:
非特异性扩增太多了,估计引物需要重新设计,另外建议退火温度做个梯度,看看哪个温度比较合适!

已经是梯度了,从左至右45-65度
21楼2010-12-10 13:22:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

skkyy88888

铜虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
用这个引物P另外两种物种获得的条带是多大呢?貌似MAKER 2-3之间那个带比较像ACTIN.呵呵。
22楼2010-12-10 14:23:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

feiye2214

木虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by piaopiao233 at 2010-12-10 11:39:19:
还要再问一句,你用的什么酶啊,高保真的?

显色剂是EB,宝生物的普通PCR rTaq酶,并非高保真
23楼2010-12-10 14:52:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

feiye2214

木虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by yujiaping1 at 2010-12-10 09:52:18:
杂带不是问题,关键是这些杂带中有没有和目的片段大小一致的条带???

呵呵,目的片段是4kb左右,这里没有啊,汗那
24楼2010-12-10 14:58:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yujiaping1

木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
鱼类和乌贼亲缘关系太远了,所以楼主无法获得目的条带,我想这是主要原因,乌贼是软体动物,楼主甚至应该考虑用贝类的基因,都不应该考虑用鱼类的,我给点建议,查一下太平洋牡蛎、鲍等,是否有测序的beta-actin。你目前的引物还是放弃吧,扩出来的带,显然不可能是目的条带,筛选温度和touch-down都是浪费时间
25楼2010-12-10 21:29:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

feiye2214

木虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by yujiaping1 at 2010-12-10 21:29:18:
鱼类和乌贼亲缘关系太远了,所以楼主无法获得目的条带,我想这是主要原因,乌贼是软体动物,楼主甚至应该考虑用贝类的基因,都不应该考虑用鱼类的,我给点建议,查一下太平洋牡蛎、鲍等,是否有测序的beta-actin。 ...

多谢多谢,我会去查查!
26楼2010-12-10 21:43:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

keqindeng

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
影响pcr的因素包括pcr仪器,Taq酶,引物,模板,一个个排除吧。
另外建议生物实验最好同时做阴性,阳性对照,出了问题能马上找到原因。
27楼2010-12-11 00:49:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lwzxl007

木虫 (小有名气)

不懂,顶了
28楼2010-12-25 21:57:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jerry110

新虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
这是pcr结果啊?怎么咋一看像是marker,呵呵
29楼2010-12-26 10:02:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

水滴娃娃

铁虫 (初入文坛)

绝对是引物的问题
30楼2010-12-26 10:10:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 feiye2214 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿西安交通大学材料工程专业 282分求调剂 +11 枫桥ZL 2026-03-18 13/650 2026-03-22 20:26 by edmund7
[考研] 材料与化工085600,总分304,本科有两篇sci参与,求调剂 +4 幸运的酱酱 2026-03-22 5/250 2026-03-22 20:15 by edmund7
[考研] 一志愿武理材料工程348求调剂 +5  ̄^ ̄゜汗 2026-03-19 7/350 2026-03-22 19:44 by 公瑾逍遥
[考研] 306求调剂 +6 chuanzhu川烛 2026-03-18 6/300 2026-03-22 19:39 by 公瑾逍遥
[考研] 一志愿 西北大学 ,070300化学学硕,总分287,双非一本,求调剂。 +3 晨昏线与星海 2026-03-20 3/150 2026-03-22 16:00 by ColorlessPI
[考研] 生物学调剂 +5 Surekei 2026-03-21 5/250 2026-03-22 14:39 by tcx007
[考研] 考研调剂 +4 来好运来来来 2026-03-21 4/200 2026-03-22 12:15 by 星空星月
[考研] 材料学硕301分求调剂 +7 Liyouyumairs 2026-03-21 7/350 2026-03-21 22:31 by peike
[考研] 材料学硕333求调剂 +3 北道巷 2026-03-18 3/150 2026-03-21 18:17 by 学员8dgXkO
[考研] 278求调剂 +9 烟火先于春 2026-03-17 9/450 2026-03-21 17:47 by 学员8dgXkO
[考研] 279求调剂 +5 红衣隐官 2026-03-21 5/250 2026-03-21 14:59 by lature00
[考研] 22 350 本科985求调剂,求老登收留 +3 李轶男003 2026-03-20 3/150 2026-03-21 13:28 by 搏击518
[考研] 301求调剂 +10 yy要上岸呀 2026-03-17 10/500 2026-03-21 03:14 by JourneyLucky
[考研] 二本跨考郑大材料306英一数二 +3 z1z2z3879 2026-03-17 3/150 2026-03-21 02:29 by JourneyLucky
[考研] 332求调剂 +4 ydfyh 2026-03-17 4/200 2026-03-21 02:20 by JourneyLucky
[考研] 304求调剂 +6 曼殊2266 2026-03-18 6/300 2026-03-21 00:32 by JourneyLucky
[考研] 一志愿南理工085701环境302求调剂院校 +3 葵梓卫队 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:28 by zhukairuo
[考研] 081700化工学硕调剂 +3 【1】 2026-03-16 3/150 2026-03-19 23:40 by edmund7
[考博] 26申博 +4 八6八68 2026-03-16 4/200 2026-03-17 13:00 by 轻松不少随
[考研] 一志愿南京大学,080500材料科学与工程,调剂 +4 Jy? 2026-03-16 4/200 2026-03-17 11:02 by gaoqiong
信息提示
请填处理意见