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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】周质蛋白的提取
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skkyy88888

铜虫 (著名写手)

[交流] 【求助/交流】周质蛋白的提取 已有4人参与

刚开始做的时候周质蛋白的量还比较高，可后来换了菌株后周质蛋白的量就明显下降，最开始的总蛋白过G-25怎么也有1000uam以上，后来的就只有200-300了。奇怪了。有没有做过的高手赐教。谢谢。
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1楼 2010-12-09 12:28:54
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zhang_teng

银虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
不能轻易换菌株吧。我没做过这个，但是实验摸好条件就不要改了。不然很容易做不出来了
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2楼2010-12-09 13:27:24
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skkyy88888

铜虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by zhang_teng at 2010-12-09 13:27:24:
不能轻易换菌株吧。我没做过这个，但是实验摸好条件就不要改了。不然很容易做不出来了

是不同的质粒，都是用TOP10表达的。
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3楼2010-12-09 13:35:33
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zhang_teng

银虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
那你是就做这一次还是做了几次都不好，如果是后者，建议还用原来的质粒
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4楼2010-12-09 13:39:20
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skkyy88888

铜虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by zhang_teng at 2010-12-09 13:39:20:
那你是就做这一次还是做了几次都不好，如果是后者，建议还用原来的质粒

质粒是不一样的，表达的东西有差别。不晓得是不是我提蛋白的时候有问题了。
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5楼2010-12-09 14:06:31
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zhang_teng

银虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
也有可能，再做一次试试看
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6楼2010-12-09 14:08:35
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skkyy88888

铜虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by zhang_teng at 2010-12-09 14:08:35:
也有可能，再做一次试试看

美女，做了很多次了。
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7楼2010-12-09 14:09:46
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zhang_teng

银虫 (小有名气)
★ ★
rainwander(金币+2):哈哈，很活跃，鼓励积极参与~~~ 2010-12-09 16:20:19
引用回帖:
Originally posted by skkyy88888 at 2010-12-09 14:09:46:

美女，做了很多次了。

我不是美女
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8楼2010-12-09 15:00:05
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cecilia533

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
楼主您是如何提取周质蛋白？能否请教下。我用溶菌酶法提取时总是能把阴性对照（胞内酶）提取出来，怀疑是细胞内壁也被破了，您是否也遇到过这样的情况呢？
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9楼2012-06-13 10:46:23
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windsor2011

银虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
如果是用不同的质粒，还都是用TOP10表达，那表达的效果肯定有差异，你可以换一个表达载体试试。
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只要功夫深铁杵磨成针
10楼2012-06-15 14:41:27
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