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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 综合其他 » 【求助/交流】PCR拖尾
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精精

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】PCR拖尾 已有10人参与

我用细菌338，518扩细菌V3区，以土壤DNA为模板，退火温度61度，延伸20S，结果出来目的片段挺亮的，但是条带拖尾很严重，请教各位大虾这个该如何优化？
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少才微善
1楼 2010-12-07 21:06:29
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精精

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by waiwaidou_1983 at 2011-01-11 20:39:58:
一个是模板浓度可以稀释梯度 看看哪个浓度好
扩增的酶也可以换一下，换一下保真性高一点的，带可能会好点，但是保真性也不能非常好，非常好量少，影响下一步实验

好的，高保真酶一般是指pfu酶吗？
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少才微善
13楼2011-01-12 17:21:55
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查看全部 28 个回答

孙盛楠

木虫 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
rainwander(金币+1):鼓励积极参与~~~ 2010-12-09 20:18:42
引用回帖:
Originally posted by 精精 at 2010-12-07 21:06:29:
我用细菌338，518扩细菌V3区，以土壤DNA为模板，退火温度61度，延伸20S，结果出来目的片段挺亮的，但是条带拖尾很严重，请教各位大虾这个该如何优化？

个人认为：样品溶解不均匀，存在降解。还可以将胶做薄些，电压低些，慢跑看效果。
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2楼2010-12-08 10:44:26
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精精

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 孙盛楠 at 2010-12-08 10:44:26:


个人认为：样品溶解不均匀，存在降解。还可以将胶做薄些，电压低些，慢跑看效果。

谢谢楼上的，楼上说的很有道理~~我同样的样品，换个人批就没有拖尾，换块胶拖尾程度也不一样
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少才微善
3楼2010-12-09 20:00:21
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tsq0126

金虫 (小有名气)

是不是这样的图啊，我和你做的是一样的

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
dhd997(金币+1):鼓励上图 2010-12-11 13:58:39
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4楼2010-12-11 12:17:50
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