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busizhishen铜虫 (小有名气)
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[交流]
【求助/交流】DNase I疑难杂症 急急急
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我购买的 DNase I（RNase Free）1000U Concentration :1U/μl Supplied with :1ml of 10xReaction Buffer with MgCl2 1ml of 25mM EDTA 在提植物线粒体DNA的过程中要除去线粒体外的DNA，我发现很多文献上都是说加入DNaseⅠ至终浓度20-40μg /ml，加MgCl2至终浓度10mmol/L，我有几个问题想向大家咨询一下： 1.我有点不明白我购买的DNase I如果满足上面的条件应该加多少呢？是怎么计算的呢？ 2.10XBuffer该加多少呢？在此过程的温度是水浴还是冰浴？反应时间？ 3.DNase I,10XBuffer,在除DNA的过程中加多少超纯水，三者比例如何？ 4..终止DNaseⅠ反应时加入EDTA至终浓度20mmol/L，那么EDTA加多少呢？反应温度是多少呢？反应时间？ 谢谢大家！ |
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