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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】基因转化求助
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匿名

用户注销 (著名写手)
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1楼2010-12-01 17:17:13
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天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
dhd997(金币+1):鼓励交流 2010-12-01 18:48:20
不太明白你想说什么？
但是如果你想把目的基因连接至载体上，当然得双酶切了，而且这两个酶切位点在基因内部不能有，在载体上也必须是单一的位点！
赞一下(2人) 回复此楼
Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
2楼2010-12-01 17:45:04
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ben1147

木虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
dhd997(金币+1):谢谢交流 2010-12-01 18:48:31
引用回帖:
Originally posted by NXYLGL2008 at 2010-12-01 17:17:13:
我的基因序列在pMD18-T载体上，在我的序列内部没有sph1、sse8387I、pstI，以及xbalI、smalI、xmalI、kpnI、sacI、ecorI，这些限制酶切点，如果用双酶切的话，找不到合适的表达载体，哪位高手可以推荐一个？

克隆载体和表达载体的酶切位点不合适的话就PCR呗，引物上酶切位点随便加了
按目的载体上来就行

是根据手头有的载体来决定什么酶切，不是根据位点来定载体。本末不要倒置
赞一下(2人) 回复此楼
3楼2010-12-01 18:28:49
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