| 查看: 4211 | 回复: 2 | |||
挥汗如雨至尊木虫 (职业作家)
|
[交流]
【求助】【求助/交流】TCA法提取蛋白最后溶解离心出现大量粘稠透明的胶状物质是什么原 已有2人参与
|
|
近一次用TCA/丙酮法 提取植物叶片总蛋白,在最后丙酮洗涤沉淀凉干、裂解液再溶解后离心取上清时，在上清和沉淀物之间出现大量粘稠透明的胶状物质，以前重来没有过这种情况。求助蛋白高手指点这是什么原因造成的？如何 避免再出现类似情况？这些粘稠透明的胶状物质难道是难溶的蛋白？是由于这次操作沉淀凉干时间过长，造成蛋白不可逆变性聚集难溶？ 下面是我这次提取具体过程： TCA/丙酮法 （1） 将植物叶片样品 250 mg液氮研磨粉末重悬在1.5 ml TCA提取缓冲液中，-20℃放置过夜(以前做时是6小时)，蛋白会形成白色沉淀。 （2） 5000g，4℃离心15min。用Tip头小心吸取上清丢弃。 （3） 在沉淀中加入1.6 ml冰预冷的丙酮，5000g，4℃离心10min。用Tip头小心吸取上清丢弃。 （4） 重复步骤2-3次。 （5） 将沉淀晾干（这次感觉比以前晾干时间长），使用800 ul裂解液溶解沉淀。(由于实验做到这步已经半夜了，所以就放入-20℃过夜,第二天才做的下一步。以前做都是直接进行下一步) （6） 40000g，4℃离心30min。取出上清，测定蛋白质浓度。（这步在上清和沉淀物之间出现大量粘稠透明的胶状物质，以前重来没有过这种情况） |
回复此楼» 猜你喜欢
售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急
已经有6人回复
-
售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急
已经有4人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急
已经有3人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急
已经有4人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急
已经有6人回复
-
售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急
已经有3人回复
-
售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急
已经有3人回复
-
求教各位大神：2026教育部人文社科青年基金项目何时公示呀？
已经有7人回复
-
浙江师范大学是怎么坑我的
已经有6人回复
-
售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急
已经有3人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 天然有机化合物提取分离与结构鉴定
已经有26人回复
- 雷酸金溶解过程中生成白色沉淀
已经有35人回复
- 联苯乙烯二苯基二磺酸二钠是什么物质？有毒吗？能用在面膜中吗?
已经有4人回复
- 求助 挥发油提取
已经有29人回复
- 关于质谱测定蛋白质分子量的图谱分析
已经有19人回复
- 等密度下超临界CO2对聚合物的溶解性
已经有10人回复
- 问一下常见的蛋白质的直径大小范围
已经有6人回复
- 固体溶解在液体中溶液的密度和粘度
已经有10人回复
- 土壤吸附有机农药的实验，有机物在水中的溶解度只有0.4ppm
已经有9人回复
- 制盐粒度太细无法离心 影响生产
已经有10人回复
- 聚氨酯胶粒溶解时溶剂的选择问题
已经有5人回复
- 上市药企招聘药理学和蛋白质化学人才
已经有8人回复
- 两个物质混合后如何选择激发光谱？
已经有6人回复
- 关于降低植物油+不溶解固体浆料的粘度问题？！
已经有3人回复
- TCA/丙酮法提取植物蛋白
已经有10人回复
- 高速离心机的使用分析（一）
已经有6人回复
18146618454
新虫 (初入文坛)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 99.2
- 散金: 10
- 红花: 1
- 帖子: 38
- 在线: 26.3小时
- 虫号: 4679401
- 注册: 2016-05-11
- 性别: GG
- 专业: 作物分子育种
2楼2017-05-11 09:36:38
3楼2018-01-02 21:05:11
10