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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 综合其他 » 【求助/交流】构建克隆文库时如何提高连接和转化的效率
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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dljgzm

铜虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】构建克隆文库时如何提高连接和转化的效率 已有2人参与

求好心人帮忙：我构建环境中的细菌文库，但是连接和转化的效率不高
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1楼 2010-11-25 16:03:18
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iaminxanadu

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
1. 载体及外源片段纯度
2.连接比例很关键
3.一个小技巧：双酶切一个已在克隆位点上连接了一片段的载体，切胶回收。这样很大程度上避免了假阳性。
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3楼2010-11-30 14:24:07
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

文献杰出贡献
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
呵呵，是做metagenomic library 么？

纯化DNA是王道，DNA的纯化是最最关键的。可以买试剂盒，fosmid 的或者 cosmid试剂盒有售。
赞一下(1人) 回复此楼
The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
2楼2010-11-25 16:06:51
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