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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 材料区 » 生物材料 » 材料表征测试 » 【求助】紫外分光光度仪--光度测定
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hwandy87

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助】紫外分光光度仪--光度测定

想测定某种物质在570nm的光吸收度。我在试验中的操作顺序主要是：1、将对照品分别装到两个比色皿中，然后置于仪器中作参比校准，先是调零，调整基线，随后是浪打（打不出来，不过谐音一下，大家都知道是什么意思）到570nm。2、取出样品槽的比色皿，用蒸馏水洗净后，将皿内的水分甩干，然后装入样品，开始测定。
       但为什么每次测定的数据都是负的呢？希望懂的虫友能指点一下迷津啊？万分感谢...
      跪求！！！！！！！！
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1楼2010-11-10 16:25:05
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zxmxyh

金虫 (小有名气)
★
shileinjut(金币+1):谢谢参与！ 2010-11-11 10:22:06
hwandy87(金币+5): 2010-11-11 12:05:39
你样品的浓度是不是太低了？
多加点试试
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2楼2010-11-11 10:09:11
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viviannea

金虫 (正式写手)
★
shileinjut(金币+1):谢谢参与！ 2010-11-11 11:51:17
hwandy87(金币+5): 2010-11-11 12:06:02
基线使用的标液可能出问题了，瓶子不是很干净有残留，重新配液再做一次；两个比色皿不是一套的；检查蒸馏水。

[ Last edited by viviannea on 2010-11-11 at 10:45 ]
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3楼2010-11-11 10:37:57
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901188

木虫 (著名写手)
★
shileinjut(金币+1):谢谢参与！ 2010-11-11 16:12:19
hwandy87(金币+5): 2010-11-12 16:50:15
你的紫外分光光度仪的测量范围有设置到570nm这个范围吗？你比色皿你的比色溶液用没用对。
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4楼2010-11-11 15:50:37
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ouhua

金虫 (著名写手)
★
shileinjut(金币+1):谢谢参与！ 2010-11-11 16:12:27
hwandy87(金币+5): 2010-11-12 16:49:46
先570nm处以空白溶液调零,再测对照品、样品。如果你的空白有吸收且比较大，就会使样品成负。
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5楼2010-11-11 16:06:48
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hwandy87

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by viviannea at 2010-11-11 10:37:57:
基线使用的标液可能出问题了，瓶子不是很干净有残留，重新配液再做一次；两个比色皿不是一套的；检查蒸馏水。

[ Last edited by viviannea on 2010-11-11 at 10:45 ]

是设在570nm这个波长下...就是检测在570nm有没有光吸收...
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6楼2010-11-12 16:49:29
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viviannea

金虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
shileinjut(金币+1):谢谢参与！ 2010-11-15 15:54:33
引用回帖:
Originally posted by hwandy87 at 2010-11-12 16:49:29:


是设在570nm这个波长下...就是检测在570nm有没有光吸收...

在400nm~800nm范围内做一个扫描，就能看出有没有吸收，前提是紫外分光光度计够好。哎！

[ Last edited by viviannea on 2010-11-15 at 14:31 ]
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7楼2010-11-15 14:30:11
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huochengli

铁杆木虫 (著名写手)
★
shileinjut(金币+1):谢谢参与！ 2010-11-16 13:08:18
皿差测了吗？
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8楼2010-11-16 13:01:10
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hwandy87

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by huochengli at 2010-11-16 13:01:10:
皿差测了吗？

这个会有很大的影响吗？
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9楼2010-11-18 14:23:33
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queece

铜虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by hwandy87 at 2010-11-10 16:25:05:
想测定某种物质在570nm的光吸收度。我在试验中的操作顺序主要是：1、将对照品分别装到两个比色皿中，然后置于仪器中作参比校准，先是调零，调整基线，随后是浪打（打不出来，不过谐音一下，大家都知道是什么意思） ...

应该先点“基线”，再点“到波长”，再点“自动调零”。
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10楼2010-11-19 15:33:13
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monica0914

银虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
天天都用分光光度计，但都是测量光谱，现在终于知道还可以测试光度了，不过，你的比色皿、溶液浓度，极限校准都没问题吗？
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11楼2010-12-16 09:51:42
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