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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】关于大肠杆菌感受态细胞保存的问题
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sai00fuji

金虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】关于大肠杆菌感受态细胞保存的问题 已有7人参与

做好的感受态细胞应该怎么保存呢？
除了-80，能不能放在-20短时间保存呢？
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1楼 2010-11-05 14:34:28
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magy2006

木虫 (著名写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
dhd997(金币+1):鼓励交流。 2010-11-05 19:02:39
放置一周没问题
时间长了就不敢保证了
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2楼2010-11-05 16:34:55
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jhu132llh

荣誉版主 (知名作家)

大洪
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
dhd997(金币+2):good 2010-11-05 19:02:28
还是-80度吧
-20度，菌体质量没有保证
-80度冻存的感受态都得赶紧用完，更何况-20度
你要是实在要放-20度的话，也就三五天吧，再长的话估计你也转不进去
赞一下(2人) 回复此楼
青春的岁月，我们身不由己，只因这胸中燃烧的梦想！
3楼2010-11-05 18:03:03
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可以肥下去

新虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
如果四五天之内，其实放在四度也是可以的，影响不大。放在-20反而是不好的，因为在这个温度，特殊的冰晶结构会对感受态细胞造成伤害
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4楼2011-01-14 10:11:04
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wenwen4599

金虫 (正式写手)
★ ★
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西瓜(金币+1): 鼓励应助 2012-03-11 16:25:07
制备好的感受态细胞加甘油至终浓度10-15%，-80保存，这个分子克隆指南上都有说的，建议楼主按照指南去做。有的时候看起来只是一个无所谓的小细节，但经常会导致实验的失败。
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5楼2012-03-11 10:44:18
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西瓜

荣誉版主 (知名作家)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
5楼: Originally posted by wenwen4599 at 2012-03-11 10:44:18:
制备好的感受态细胞加甘油至终浓度10-15%，-80保存，这个分子克隆指南上都有说的，建议楼主按照指南去做。有的时候看起来只是一个无所谓的小细节，但经常会导致实验的失败。

有的方法是之前的缓冲液已经有甘油或者DMSO了，所以做好之后直接就可以冻了。分子克隆上有三种方法，有最后一步加DMSO的，不过貌似没有在冻之前加甘油的（之前制备时已经加了甘油）。
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6楼2012-03-11 16:28:39
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跳跳鱼

木虫 (著名写手)
不好
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快乐奋斗，创造所有。
7楼2012-03-12 20:09:18
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木棉花的爱

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
请问楼主，感受态您是怎么做的？
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木棉花的爱
8楼2013-06-27 17:27:42
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