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【求助/交流】SDS-PAGE检测蛋白纯度
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求知的学生
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专业: 药物分析
[交流]
【求助/交流】SDS-PAGE检测蛋白纯度
已有11人参与
大家好,我现在有一些蛋白质的冻干粉,想用SDS-PAGE测一下纯度,应该如何做?胶跑完之后,该如何处理,怎么计算浓度?望不吝赐教,谢谢!
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2010-11-03 11:48:27
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hzxizh
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★ ★ ★
小木虫(金币
+0.5
):给个红包,谢谢回帖交流
scelab(金币+2):热心虫友,欢迎多来交流~~~:tiger06::tiger28::tiger23: 2010-11-03 23:33:30
要测纯度,建议15%的分离胶电泳;但最好用HPLC。
要测浓度,建议BSA标定曲线,用福林酚法测定。不要有电泳估算蛋白浓度。
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11楼
2010-11-03 22:45:52
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lxj341401
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专业: 生物化学
★ ★
求知的学生(金币
+1
):谢谢参与
dhd997(金币+1):鼓励交流。 2010-11-03 14:25:25
求知的学生(金币+1): 2010-11-03 17:11:00
蛋白粉加LOADING BUFFER后加热处理,再SDS-PAGE电泳,考马斯亮蓝或者银染,检测纯度。测浓度的话用考马斯亮蓝G250法595nm测定好了。具体操作一般的实验书上都有的。
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3楼
2010-11-03 14:21:56
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HarveyWang
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★
求知的学生(金币
+1
):谢谢参与
楼上说得很全了,
另外建议,
如果自己没做过,还是找个此类实验室的好。
那些试剂自己配太麻烦了。
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【我一直认为做土匪很性感很坏,很直接,可以大声喊:JCMM我爱你!所以,我自从博士毕业后,就一直在寻找黑道大哥一起去抢钱、抢粮、抢地盘】
4楼
2010-11-03 16:10:59
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专业: 药物分析
谢谢各位的热心解答!
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5楼
2010-11-03 17:12:16
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