24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 1743  |  回复: 4
本帖产生 1 个 博学EPI ,点击这里进行查看
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

jian132678

金虫 (正式写手)

[交流] 用HPLC分离DNA

我第一次用HPLC分离DNA,出了几个峰,因为没有荧光,不好判断哪个峰是真正的DNA。我的DNA有78个碱基,用BIOTIN修饰,有人说应该很快出峰,有人说要很久才出峰,我第一次做,没经验,一下出了三个峰,怎么判断啊!
谢谢!

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Adam_Li

铜虫 (初入文坛)

jian132678(金币+4, 博学EPI+1):THANKS 2010-12-19 23:28:20
如果你用的是常用的 水——乙腈流动相的话,样品的出峰时间主要是由亲水性决定的。第一次做的话确实很难分辨哪个是你想要的,因为你要对目标DNA的理化性质,空间结构非常了解,才能确定其亲水性,而且不排除样品中有性质与目标DNA的杂质存在。所以还是建议你把几个峰都收集起来,做好标记,然后拿去做质谱,确定哪个峰时你需要的,以后收集的时候就可以直接在那个出峰时间附近直接收集了。
3楼2010-12-18 12:55:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答

Adam_Li

铜虫 (初入文坛)

如果你用的是常用的 水——乙腈流动相的话,样品的出峰时间主要是由亲水性决定的。第一次做的话确实很难分辨哪个是你想要的,因为你要对目标DNA的理化性质,空间结构非常了解,才能确定其亲水性,而且不排除样品中有性质与目标DNA相似的杂质存在。所以还是建议你把几个峰都收集起来,做好标记,然后拿去做质谱,确定哪个峰时你需要的,以后收集的时候就可以直接在那个出峰时间附近直接收集了。
4楼2010-12-18 12:56:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liuwei8999

银虫 (小有名气)

jian132678(金币+4):谢谢! 2010-12-19 23:28:39
想办法把你的DNA破坏掉,然后再次HPLC哪个峰没了  ,大部分可能就是你要的了。专业知识俺不行,只是个建议
5楼2010-12-19 09:05:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 297,工科调剂? +4 河南农业大学-能 2026-04-14 4/200 2026-04-16 22:52 by wulijun2012
[考研] 300求调剂 +11 橙a777 2026-04-15 11/550 2026-04-16 22:43 by cfdbai
[考研] 297,工科调剂? +10 河南农业大学-能 2026-04-14 10/500 2026-04-15 21:50 by noqvsozv
[考研] 085404 22408 309分求调剂 +9 lzmk 2026-04-14 10/500 2026-04-15 20:02 by 学员JpLReM
[考研] 310求调剂 +16 666真好 2026-04-11 18/900 2026-04-15 13:28 by 黑科技矿业
[考研] 材料工程281还有调剂机会吗 +43 xaw. 2026-04-11 44/2200 2026-04-15 12:46 by 西北望—风沙
[考研] 211本科材料化工求调剂 +19 YHLAH 2026-04-11 23/1150 2026-04-14 22:25 by fenglj492
[考研] 考研求调剂 +6 ban班小七 2026-04-11 6/300 2026-04-14 14:06 by 哆啦A梦只是个梦
[考研] 297求调剂 +23 ORCHID1 2026-04-10 26/1300 2026-04-14 13:52 by 陈皮皮
[考研] 305求调剂 +8 玛卡巴卡boom 2026-04-11 8/400 2026-04-14 09:04 by pengliang8036
[考研] 2026硕士调剂_能动_河南农业大学 +4 河南农业大学-能 2026-04-12 4/200 2026-04-13 22:01 by bljnqdcc
[考研] 一志愿中南大学 0855 机械 286 求调剂 +11 不会吃肉 2026-04-12 11/550 2026-04-13 21:59 by bljnqdcc
[考研] 0854调剂 +10 长弓傲 2026-04-11 11/550 2026-04-13 10:38 by wp06
[考研] 344 材料专业 求调剂211 无地域要求 +8 hualkop 2026-04-11 8/400 2026-04-12 22:24 by fqwang
[教师之家] 山东双非院校考核超级无底线,领导幸灾乐祸,教师遭殃恐 +3 qut2026 2026-04-11 7/350 2026-04-12 20:24 by qut2026
[考研] 339求调剂 +8 hanwudada 2026-04-11 9/450 2026-04-12 15:36 by laoshidan
[考研] 331求调剂 +5 王国帅 2026-04-11 5/250 2026-04-11 22:56 by 溪涧流水
[考研] 085600材料与化工329分求调剂 +16 叶zilin 2026-04-10 16/800 2026-04-11 11:04 by may_新宇
[考研] 337求调剂 +4 研s. 2026-04-10 4/200 2026-04-11 08:57 by zhq0425
[考研] 346,工科0854求调剂,专硕 +7 moser233 2026-04-10 8/400 2026-04-11 08:52 by 猪会飞
信息提示
请填处理意见