24小时热门版块排行榜    

CyRhmU.jpeg
查看: 1646  |  回复: 4
本帖产生 1 个 博学EPI ,点击这里进行查看

jian132678

金虫 (正式写手)

[交流] 用HPLC分离DNA

我第一次用HPLC分离DNA,出了几个峰,因为没有荧光,不好判断哪个峰是真正的DNA。我的DNA有78个碱基,用BIOTIN修饰,有人说应该很快出峰,有人说要很久才出峰,我第一次做,没经验,一下出了三个峰,怎么判断啊!
谢谢!
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

逍遥小傲

木虫 (著名写手)

YUE-jf:呵呵 请勿灌水 2010-11-02 09:37:58
2楼2010-11-02 06:49:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Adam_Li

铜虫 (初入文坛)

jian132678(金币+4, 博学EPI+1):THANKS 2010-12-19 23:28:20
如果你用的是常用的 水——乙腈流动相的话,样品的出峰时间主要是由亲水性决定的。第一次做的话确实很难分辨哪个是你想要的,因为你要对目标DNA的理化性质,空间结构非常了解,才能确定其亲水性,而且不排除样品中有性质与目标DNA的杂质存在。所以还是建议你把几个峰都收集起来,做好标记,然后拿去做质谱,确定哪个峰时你需要的,以后收集的时候就可以直接在那个出峰时间附近直接收集了。
3楼2010-12-18 12:55:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Adam_Li

铜虫 (初入文坛)

如果你用的是常用的 水——乙腈流动相的话,样品的出峰时间主要是由亲水性决定的。第一次做的话确实很难分辨哪个是你想要的,因为你要对目标DNA的理化性质,空间结构非常了解,才能确定其亲水性,而且不排除样品中有性质与目标DNA相似的杂质存在。所以还是建议你把几个峰都收集起来,做好标记,然后拿去做质谱,确定哪个峰时你需要的,以后收集的时候就可以直接在那个出峰时间附近直接收集了。
4楼2010-12-18 12:56:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liuwei8999

银虫 (小有名气)

jian132678(金币+4):谢谢! 2010-12-19 23:28:39
想办法把你的DNA破坏掉,然后再次HPLC哪个峰没了  ,大部分可能就是你要的了。专业知识俺不行,只是个建议
5楼2010-12-19 09:05:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 jian132678 的主题更新
普通表情 高级回复(可上传附件)
信息提示
请填处理意见