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【求助/交流】细胞复苏不成功,出现了一些问题。
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apple1057
新虫
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[交流]
【求助/交流】细胞复苏不成功,出现了一些问题。
已有10人参与
大家好,我们实验室的细胞最近出了些问题,每次复苏后都长得不好,形态改变而且不太增殖,最后在显微镜下观察,贴壁细胞很少,我们养的是PIEC细胞,以前都是消化后12小时就能长满,现在复苏后两天,丰度30%左右,我们实验都很注意,培养基.血清都换了,观察瓶内也没有污染,我想请教一下这是怎么回事?谢谢
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1楼
2010-10-28 14:57:39
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hua_geduo
木虫
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性别: GG
专业: 生物化学
请你给我短消息回复吧,要不我不知道怎么再找到这个帖子了,谢谢
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13楼
2013-01-10 09:47:20
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liyangmiscap
木虫
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★
小木虫(金币
+0.5
):给个红包,谢谢回帖交流
是不是冻存的细胞出了问题?
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(1人)
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愿与你携手,沿河看柳
2楼
2010-10-28 15:12:48
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apple1057
新虫
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虫号: 1129984
注册: 2010-10-23
谢谢你的回复,我们之前冻存的时候,冻存盒没有复温,会不会有很大影响?但是之前复苏的一次成功了,这次复苏观察,视野中有贴壁的,也有很多圆形细胞,而且有些细胞形态不好,呈长条状,甚至有些细胞发生了裂解。
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3楼
2010-10-28 15:34:26
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jhu132llh
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小木虫(金币
+0.5
):给个红包,谢谢回帖交流
dhd997(金币+1):谢谢交流。 2010-10-28 16:14:23
看你的描述,应该不存在污染的问题,细胞本身也没问题。
血清和培养液也问题。
那么,
可能是冻存的时候出问题了,可能是冻存液的问题,也可能是冻存程序的问题,也可能是手法的问题;
也有可能是你们跟换了培养液,细胞对不同厂家甚至不同批次的培养液都会有反应的
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青春的岁月,我们身不由己,只因这胸中燃烧的梦想!
4楼
2010-10-28 15:46:31
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