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【求助/交流】RFLP中的限制性内切酶如何选择
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凌-强
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[交流]
【求助/交流】RFLP中的限制性内切酶如何选择
已有4人参与
小弟最近要做RFLP,前面DNA是用通用引物做PCR,所以小弟对这里选择限制性内切酶很迷茫,不知道该怎么选择?
大侠们。帮帮忙,解决下
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1楼
2010-10-28 12:29:24
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wangpl191
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2010-10-29 10:03:57
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susizheng
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):给个红包,谢谢回帖交流
选碱基数比较少的酶,比如4个碱基的。Dpn I.
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2楼
2010-10-28 15:39:16
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凌-强
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引用回帖:
Originally posted by
susizheng
at 2010-10-28 15:39:16:
选碱基数比较少的酶,比如4个碱基的。Dpn I.
能说的详细点吗?
我做的是肠道微生物方面,做的是细菌总DNA,所以才不知道这方面该怎么选酶,我看见有人文章提到用25种酶,太恐怖了
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3楼
2010-10-28 17:34:09
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dhd997(金币+2):鼓励交流。 2010-10-28 19:35:59
我的意思是不同的酶切位点识别的碱基对数不同,一般是6个比较常见,但是也有8个的,比如Not I,也有4个的,比如Dpn I。你做多态性分析,尽量选择识别碱基数少的酶切位点,这样的酶切位点一般出现的概率较大,酶切后容易得到差异性。
不过现在这样做多态性分析的很少了,直接全部测序一比对也就完事了,测序也不贵。
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Thank-you,so-blue.
4楼
2010-10-28 18:29:15
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