应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】连接产物，是否可以直接做PCR模板？
182/2返回列表上一页12
查看: 3916  |  回复: 17
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

langduiyue

银虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by gylry at 2010-10-27 13:24:13:
我也正想问关于连接的问题呢，请高人指点

可以的 没有问题。 你可以看一下MLPA技术。 这个技术就是先 连探针， 连完以后再做pcr.

做前变一下性，  跑个电泳， 模板稀释到合适的浓度。

菌液都能做pcr, 那成分可是复杂的多
赞一下(1人) 回复此楼
角逐自我
11楼2010-10-27 14:54:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

langduiyue

银虫 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
amisking(金币+1):鼓励交流！ 2010-10-27 19:57:23
不好意思  引用错了  我是要引用6楼的话。

不过我也知道   pcr 产物能否直接用于TA克隆  还用不用磷酸化
赞一下(2人) 回复此楼
角逐自我
12楼2010-10-27 14:58:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

文献杰出贡献
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by ben1147 at 2010-10-27 14:33:32:

反向PCR，连接的是酶切的末端，5‘都有磷酸，当然能连上
而测序的那都是在菌里复制过的了，肯定没有nick
而PCR产物直接连接的情况是不一样的

，要我给你上文献么？ 核酸研究杂志上的，1998年的文献。
赞一下(1人) 回复此楼
The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
13楼2010-10-27 15:42:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

最爱花诗雨

金虫 (正式写手)

穷鬼
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
scelab(金币+2):欢迎多来交流！:tiger06: 2010-10-27 23:10:05
理论上是可以的，只要有链接好的序列，并以此设计引物，完全没有问题；但是连接的过程会不会有杂条带或者序列的纯度等等，均会影响后面的PCR，这个问题属于验证型的，楼主自己试试不就知道可不可以了吗？不过成功了自然好，不成功的话，原因还是很多的。
赞一下(2人) 回复此楼
严于律己，宽以待人
14楼2010-10-27 15:59:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dqvictory

铁虫 (小有名气)
O(∩_∩)O谢谢各位了！学习了好多！
赞一下 回复此楼
把记忆随身携带！
15楼2010-10-27 18:49:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yzuxhq368

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
可以的，本人是连接两个片段，但效率较低，杂条带也多，不过扩出来了
赞一下(1人) 回复此楼
16楼2010-10-27 22:06:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dqvictory

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by yzuxhq368 at 2010-10-27 22:06:25:
可以的，本人是连接两个片段，但效率较低，杂条带也多，不过扩出来了

您好，谢谢您了！请问您对连接产物做了什么处理了吗？是直接PCR呢还是？
赞一下 回复此楼
把记忆随身携带！
17楼2010-10-27 22:12:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

547star

木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
连接产物用插入片段PCR得到的产物类似于大片段定点突变。某些添加耐高温DNA连接酶的PCR反应，就是又连接又扩增。
赞一下 回复此楼
为什么
18楼2013-07-09 15:24:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 dqvictory 的主题更新
182/2返回列表上一页12
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] filecode，4个jtjc了 +7 ziyangfang 2026-08-19 8/400 2026-08-19 11:40 by h初学者f
[基金申请] 2027广东省杰青 +4 奶牛小黑 2026-08-15 10/500 2026-08-19 11:02 by wanfengnew
[基金申请] 时间戳变了，能看出什么问题？ +10 基诺咪客 2026-08-17 14/700 2026-08-19 10:34 by 基诺咪客
[基金申请] 今天基金会出结果吗？20260819 +7 kkkl_v 2026-08-19 7/350 2026-08-19 10:28 by pfeng
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +8 启萌科技 2026-08-12 30/1500 2026-08-19 10:22 by 启萌科技
[基金申请] 今天放榜吗？ +11 布布和一二 2026-08-19 11/550 2026-08-19 10:06 by xter9665
[基金申请] 快农历七夕节了，轻松一下，男人悄悄话，女施主请不要进来。 +6 Tide man 2026-08-14 7/350 2026-08-19 09:56 by ZJTJZ
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +52 医学老男孩 2026-08-13 114/5700 2026-08-19 09:38 by 医学老男孩
[基金申请] 什么时候开奖？ +6 CrisMessi 2026-08-18 6/300 2026-08-19 08:06 by Equinoxhua
[基金申请] 结合人工智能，周易传统文化，filecode打分制来了，3分以上希望很大。 +4 Tide man 2026-08-12 5/250 2026-08-19 07:41 by 201120518022
[基金申请] 重要消息，中午系统在维护 +10 yuleib84 2026-08-18 11/550 2026-08-19 07:30 by 羽毛枫f
[教师之家] 为什么余额宝的年化利率越来越低？主要原因有哪些？ +3 瞬息宇宙 2026-08-15 3/150 2026-08-18 21:40 by xiaohuixin
[论文投稿] 投稿咨询 +4 wwm09 2026-08-17 6/300 2026-08-18 15:36 by wwm09
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +14 archvillain 2026-08-15 26/1300 2026-08-18 13:37 by phantomgost
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜？ +13 Ldrop2023 2026-08-13 16/800 2026-08-18 12:25 by 淀粉搬运工
[基金申请] 93BebMhtakh前后11位开头都是大写 +4 且听虎啸 2026-08-17 5/250 2026-08-18 00:49 by 蔡棒棒菂
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +6 angus9576 2026-08-17 11/550 2026-08-17 23:57 by angus9576
[精细化工] 招聘 金属平磨液，抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
[基金申请] 各位道友，我要去昆明玩几天，回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭