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gylry

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】试剂盒提不出RNA,求救啊已有24人参与

本人刚开始提RNA,用的是百泰克试剂盒提背肌的RNA,过程都按说明书做的,预防措施都做了,可连做好几次,每次结果都不行,浓度超低,都是10几ng/ul,真是郁闷啊,那位仁兄可以指点指点啊?
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阿德54007

金虫 (正式写手)

★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
scelab(金币+5):热心虫友,欢迎多来交流~~~:tiger06::tiger28::tiger23: 2010-10-29 23:53:41
我最近经常提取植物组织的RNA,用试剂盒提取还不如我们实验室自己配置的溶液好用。干燥后用30ul水溶解,提取的浓度都在几百ng/ul。
    实验的关键是:净、快。所谓的净就是实验所用的物品全部用DEPC处理过的,研钵要在烘箱高温灭菌(我们是180°)。快,就是在研磨的时候尽量快的研磨完,减少材料暴露在空气的时间,一旦研钵的液氮挥发完毕就立刻补充。
    植物和动物材料差异比较大,我说的不一定都对,希望对你的实验能有帮助。另外不要盲目的相信试剂盒,有些材料用试剂盒提取效果反而不如自己查找文献配置的药品好用。
阳光温热,岁月静好,你还没来,我怎敢老
21楼2010-10-29 23:35:03
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silicare

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gylry(金币+1):为什么我就提不出来呢?人品太差了吗? 2010-10-26 09:57:04
dhd997(金币+1):有意思。 2010-10-26 10:29:51
没有对照没法说明问题

到底是试剂盒质量呢,还是你的操作手法呢,还是试剂盒和材料不搭配呢

换个人提,换个试剂盒

问题就解决了
2楼2010-10-26 09:39:13
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amilie030312

金虫 (正式写手)


gylry(金币+1):嗯,非常感谢!顺便问下,在液氮中研磨样品时是时间长点好呢还是短点好? 2010-10-26 09:55:51
dhd997(金币+1):谢谢交流。 2010-10-26 10:30:05
如果确定样本没问题就换个人做做看,把该注意到的细节都注意了,尽量快的提完,还是不行的话就换个试剂盒吧,给那个公司打电话投诉看看, 我还是比较建议用进口的试剂盒的,要不就纯手工提。
3楼2010-10-26 09:43:28
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silicare

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小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
客观的讲,这个和人品关系不是很大

人品影响到态度,态度决定成败
4楼2010-10-26 09:59:02
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