Originally posted by langduiyue at 2010-10-26 16:15:12:
LZ  不知道的阴性 和  阳性 是个啥情况？

Originally posted by ap at 2010-10-26 10:36:40:


谢谢！
1， 已知序列
2， 以TM值低5℃开始，2℃为梯度，做过退火温度梯度；用的是Takara 的pyrobest，20ul体系用1.6ul dntp； 延伸温度是72℃。做过模板浓度的摸索。对照是用大肠基因组和相应引物做的，PCR ...

Originally posted by ap at 2010-10-26 12:58:35:


因为我的目的基因的序列的原因，卡着我的目的基因设计引物，得分都很低。我想在目的基因上下游设计引物，得到“目的基因+上下游片段”后，再以它为模板PCR这样可行吗？

Originally posted by yixuanwin at 2010-10-26 19:37:38:


假设是一个很保守的基因，那在大肠杆菌是不是也能扩增出来？


如果是已知序列。那就报道序列用的引物不更好么。