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piaoyuaaa

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】琼脂糖凝胶DNA电泳失败 已有5人参与

我提的是DNA,用试剂盒提的,紫外分光光度检测的A260为0.144,A280为0.129。然后用1%的琼脂糖凝胶液电泳,电泳时marker泳道只出现了一条蓝色条带,DNA样品加了3微升的上样缓冲液,泳道出现两条带,一条是蓝色,跑在前面,一条是浅蓝色,跑在后面,离点样孔不远。100V电压电泳,不知道怎么回事,指示条带跑得很慢,不是说一般30min吗,我都跑了快两个小时,跑在最前面的蓝色条带才到达胶的末端1cm处。更郁闷的是电泳后用含EB的1倍TBE缓冲液染色,染色后用清水漂洗,于三用紫外分析仪上观察,观察和普通肉眼看的是一样的,没有看到红色荧光条带,不知道是怎么回事?
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neuralcrest

金虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
do it again using fresh everything!
有朋自网上来不亦乐乎
8楼2013-02-10 20:49:40
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
难道你的胶有问题?或者……用水配了胶?
2楼2010-10-24 10:30:36
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piaoyuaaa

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2010-10-24 10:30:36:
难道你的胶有问题?或者……用水配了胶?

我用1倍缓冲液配的胶,难道是胶溶时出现问题?胶溶不好的话溴酚蓝那个条带怎么会跑动呢,不过跑得相当的慢
3楼2010-10-24 10:53:39
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
dhd997(金币+2):热心鼓励。 2010-10-24 15:51:26
TBE吗?TBE应该用0.5X。但加多了应该跑得更快吧……
其实没看过实际操作很难分析出什么问题
4楼2010-10-24 15:32:13
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