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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】琼脂糖凝胶DNA电泳失败
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piaoyuaaa

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】琼脂糖凝胶DNA电泳失败 已有5人参与

我提的是DNA,用试剂盒提的，紫外分光光度检测的A260为0.144，A280为0.129。然后用1%的琼脂糖凝胶液电泳，电泳时marker泳道只出现了一条蓝色条带，DNA样品加了3微升的上样缓冲液，泳道出现两条带，一条是蓝色，跑在前面，一条是浅蓝色，跑在后面，离点样孔不远。100V电压电泳，不知道怎么回事，指示条带跑得很慢，不是说一般30min吗，我都跑了快两个小时，跑在最前面的蓝色条带才到达胶的末端1cm处。更郁闷的是电泳后用含EB的1倍TBE缓冲液染色，染色后用清水漂洗，于三用紫外分析仪上观察，观察和普通肉眼看的是一样的，没有看到红色荧光条带，不知道是怎么回事？
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1楼 2010-10-24 09:26:36
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piaoyuaaa

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2010-10-24 10:30:36:
难道你的胶有问题？或者……用水配了胶？

我用1倍缓冲液配的胶，难道是胶溶时出现问题？胶溶不好的话溴酚蓝那个条带怎么会跑动呢，不过跑得相当的慢
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3楼2010-10-24 10:53:39
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
难道你的胶有问题？或者……用水配了胶？
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2010-10-24 10:30:36
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
dhd997(金币+2):热心鼓励。 2010-10-24 15:51:26
TBE吗？TBE应该用0.5X。但加多了应该跑得更快吧……
其实没看过实际操作很难分析出什么问题
赞一下(2人) 回复此楼
4楼2010-10-24 15:32:13
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1921952610

铁虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
电压加高些试试。可能是电压低了
赞一下 回复此楼
5楼2013-02-10 00:13:31
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